【摘 要】
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以拟南芥的AtMYB0(GL1,AY519590.1)基因为参比序列对雷蒙德氏棉D基因组数据库进行同源搜索、比对,从该据库中调取与AtMYB0相似度比较高的序列.利用RT-PCR从徐州142 cDNA中克
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以拟南芥的AtMYB0(GL1,AY519590.1)基因为参比序列对雷蒙德氏棉D基因组数据库进行同源搜索、比对,从该据库中调取与AtMYB0相似度比较高的序列.利用RT-PCR从徐州142 cDNA中克隆出棉花GhGL1-3基因.经RT-PCR从徐州142纤维组织中扩增得到GhGL1-3的cDNA,其开放阅读框为381 bp,编码由126个氨基酸组成的蛋白质.同源性比对分析显示GhGL1-3蛋白具有较高的保守性,进化树分析表明其与拟南AtMYB0(GLl)亲缘关系较近,相似度为51％.利用软件进行蛋白质序列分析,GhGL1-3蛋白具有MYB家族典型的结构域,属于只含一个MYB结构域(R1/2)亚族.组织表达分析表明,GhGL1-3基因在根、茎、叶、花及纤维发育不同时期均有表达,属于组成型表达基因.在0 DPA(Days post anthesis)时,GhGL1-3分别在徐州142野生型及其无绒无絮突变体的胚珠中表达量最高.将GhGL1-3基因构建到植物真核表达载体pBI121中,成功构建了pBI121-35S:GhGL1-3超表达载体.利用农杆菌通过花絮蘸染法转化野生型拟南芥(Columbia),经PCR分子鉴定,获得了GhGL1-3转基因拟南芥植株.通过对转基因植株T2代3个株系的qRTPCR分析,发现棉花GhGL1-3基因能够促使拟南芥内源基因AtMYB0表达量升高.
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