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目的巨噬细胞移动抑制因子(MIF)是与动脉粥样硬化发生和动脉粥样斑块稳定性相关的炎性因子。MIF在不稳定性粥样斑块中表达上调,MIF的中和抗体能抑制动脉粥样硬化损伤。血管紧张Ⅱ(AngⅡ)能诱导内皮细胞中MIF表达,但是作用机制不清楚。本文将研究介导AngⅡ调控人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)中MIF表达的转录因子。方法利用体外、体内的Matrigel管腔形成实验检测MIF对内皮细胞管腔形成的作用。用与血管生成相关基因的表达芯片检测20ng/mL MIF作用前后HUVECs中基因的表达,并通过定量PCR对相关基因进行鉴定。通过时间效应和剂量效应实验检测AngⅡ对MIF表达的调控作用。利用双荧光基因报告系统检测AngⅡ诱导后MIF基因5’调控区不同区段的转录活性,初步确定可能的转录因子结合序列。设计针对可能的转录因子的siRNA序列构建表达载体,分别检测候选转录因子沉默的HEAY926中MIF转录活性和MIF表达水平。利用EMSA法检测AngⅡ诱导的HEAY926中AP-1 DNA探针与和AP-1的结合活性。结果 Matrigel管腔形成实验显示,MIF能特异地促进体外、体内内皮的管腔形成作用。基因芯片检测结果显示,在检测的113个基因中,34个基因呈3倍以上的上调表达,9个基因呈3倍以上的下调表达。MIF能明显促进内皮细胞中FGF-1、MMP9、PDGF-α、TGF-α和VEGF等的表达。AngⅡ能以时间和剂量依赖方式特异调控内皮细胞中MIF的表达。双荧光报告基因检测结果显示,AngⅡ调控MIF表达的高转录活性区段位于-507至-188之间,MIF基因5’调控区-350至-339间的AP1结合序列决定MIF基因转录活性。沉默AP1亚基c-Jun后的HEAY926细胞或者用AP1抑制剂CHX处理的HEAY926细胞,AngⅡ调控的MIF转录活性显著降低(P<0 05)。c-Jun siRNA和MIFsiRNA处理HEAY926细胞,AngⅡ诱导后HEAY926中MIF的表达水平显著降低(P<0 05)。EMSA结果显示,AngⅡ能剂量依赖性地增强HEAY926中AP-1的活性。结论 AngⅡ通过转录因子AP-1调控内皮细胞中MIF的表达。