PM2.5对人肺腺癌细胞合成NO和iNOS活性的影响

来源 :中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:com_cn121
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  [目的]探讨大气PM2.5对人肺腺癌细胞(A549)合成一氧化氮(N0)、一氧化氮合酶(iNOS)活性的影响.[材料和方法]采用空气总悬浮颗粒物采样器采集南京市城区PM2.5,用去离子水超声法提取颗粒物并制成不同浓度,用电感耦合等离子质谱-色谱法测定样品中金属含量.实验细胞为人肺腺癌细胞(A549)细胞.接种A549细胞于96孔板24小时后,将PM2.5分别以0、10、25、50、100、200、400μg/ml剂量染毒24小时.细胞毒性测定用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法,一氧化氮的测定用硝酸还原酶法,一氧化氮合酶的测定用一氧化氮合酶测定试剂盒.[结果](1)PM2.5作用24小时后对人肺腺癌细胞产生一定的细胞毒性.浓度低于25μg/ml时与对照组比差异不显著,随着染毒剂量的增加,人肺腺癌细胞的存活率逐渐减低,并且呈剂量-反应关系,高剂量组存活率约为对照组的45%. (2) PM2.5致细胞一氧化氮和一氧化氮合酶释放量随剂量增加而升高,染毒剂量为100μg/ml时,培养液中一氧化氮含量达到98.96±15.77μmol/L,一氧化氮合酶含量达到15.39±0.45U/ml.(3)染毒剂量为100μg/ml和200μg/ml时,培养液中一氧化氮、一氧化氮合酶释放量差异不明显,当染毒剂量小于等于50μg/ml或达到400μg/ml时,差异明显.[结论]PM2.5以剂量依赖的方式引起细胞存活率降低,且高剂量的PM2.5可刺激人肺腺癌细胞一氧化氮和一氧化氮合酶的合成.
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