【摘 要】
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目的研究热休克蛋白90(HSP90)对新生大鼠缺氧心肌细胞的保护作用,及其对 AKT 表达的影响,探讨 HSP90在 P13K/ATK 通路中作用的分子机制。方法实验设正常对照组,缺氧组、加 HS
【机 构】
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第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室;
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目的研究热休克蛋白90(HSP90)对新生大鼠缺氧心肌细胞的保护作用,及其对 AKT 表达的影响,探讨 HSP90在 P13K/ATK 通路中作用的分子机制。方法实验设正常对照组,缺氧组、加 HSP90阻断剂 Geldanamycin(GA)组和加 GA 后再缺氧组(GA+缺氧组),建立新生大鼠心肌细胞缺氧模型,CCK-8(cell counting kit-8)检测心肌细胞活力,免疫荧光检测 HSP90蛋白分布表达情况。DNA 片断原位末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡指数(AI),Western 印迹法分析大鼠心肌细胞中 HSP90和 AKT 表达变化。结果 (1)与单纯缺氧组相比,GA+缺氧组在缺氧6h 后心肌细胞的活力下降,12h、24h 有明显下降。(2)心肌细胞缺氧后 HSP90蛋白在胞浆内表达量升高,持续到 12h 达到峰值,缺氧后24h 有所下降。(3)GA+缺氧组的 HSP90在缺氧12h、24h 有明显下降。AKT 表达量在缺氧12h 后升高并持续至24h,GA+缺氧组与单纯缺氧组相比在缺氧24h 可见心肌细胞总 AKT 表达量明显下降。(4)GA+缺氧组细胞凋亡指数为(26.3±5.3)%,与正常对照组相比细胞凋亡指数明显升高(P<0.01)。结论 HSP90在缺氧早期心肌损害中发挥内源性抗损伤作用,此作用的发挥与 HSP90和 AKT 的结合密切相关。
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