异育银鲫暴发性死亡病原初步研究

来源 :第十二届全国水产青年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong510
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  为了查明2011年9月国内某些异育银鲫(Carassius aurutus gibelio)养殖的主要产区出现暴发性的疾病,对发病鱼进行病原鉴定分析,显微镜镜检未发现寄生虫感染;从病鱼病灶组织上分离的菌落进行人工回染试验,20天内试验鱼无死亡。制备组织病理切片,发现病鱼的多个器官组织出现不同程度的病理变化;电镜下观察到细胞内有大量不同生长期的球形病毒颗粒,病毒粒子有囊膜,直径在90~170 nm;提取病鱼组织核酸,分别用鲤春病毒血症病毒(SVCV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、金鱼造血器官坏死病毒(GFHNV)的特异性引物进行聚合酶链式反应(PCR),结果只有GFHNV扩增出特异性的基因片段,而KHV和SVCV未有其对应条带出现,测序结果表明与GFHNV的参考序列有99%的相似性。用组织上清人工感染健康异育银鲫,试验鱼患病症状同自然发病症状,并从感染鱼组织中检测到GFHNV;将处理的病样上清液接种在锦鲤鳍条细胞(KF)中7d后出现明显的细胞病变(cytopathic effects,CPE),同时在经过两代盲传后的细胞经过PCR检测也获得了GFHNV阳性目的片段,并在电镜下观察到病毒粒子。根据上述结果,判定本次异育银鲫暴发性疾病是GFHNV感染。
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以患病团头鲂为研究对象,通过对病变组织进行细菌分离、纯化培养,并采用人工回感试验以确定其致病性;通过生理生化特性、16S rRNA基因部分序列和药物敏感性测定,对团头鲂出血病病原病进行了研究。根据Gen Bank收录的细胞兴奋性肠毒素alt基因和气溶素结构基因aerA的保守序列分别设计能检测alt和aer基因的特异性引物,并进行PCR反应体系和反应条件的优化。建立了一种快速检测嗜水气单胞菌双重PC