【摘 要】
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本研究根据Genebank中鸡IFN-γ和IL-2序列设计引物,采用RT-PCR法从地方品种山地乌骨鸡的外周淋巴细胞RNA中克隆了CHIFN-γ、CHIL-2基因,并进行了序列分析.结果发现:克隆的IFN基因cDNA全长549bp,开放阅读框为495bp,编码164个氨基酸.IL-2基因cDNA全长549bp,开放阅读框为432bp,编码143个氨基酸.将山地乌骨鸡IFN-γ、IL2基因测序结果与
【机 构】
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四川农业大学动物预防医学生物工程实验室,四川,雅安,625014 四川大学生命科学学院,61006
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会禽流感及免疫抑制病论坛
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本研究根据Genebank中鸡IFN-γ和IL-2序列设计引物,采用RT-PCR法从地方品种山地乌骨鸡的外周淋巴细胞RNA中克隆了CHIFN-γ、CHIL-2基因,并进行了序列分析.结果发现:克隆的IFN基因cDNA全长549bp,开放阅读框为495bp,编码164个氨基酸.IL-2基因cDNA全长549bp,开放阅读框为432bp,编码143个氨基酸.将山地乌骨鸡IFN-γ、IL2基因测序结果与Genebank上的序列用DNAstar进行分析发现,IFN-γ、IL-2与Genebank上序列同源性分别为97.2-100﹪和98.4-99.3﹪.该基因经HindⅢ和KpnⅠ双酶切后,插入同样经HindⅢ和KpnⅠ双酶切真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建真核表达质粒,研制出分子佐剂PCIFN-γ.该分子免疫佐剂PCIFN-γ可作为禽类疫苗的免疫增强剂,为进一步研究奠定基础.
其他文献
该研究以本课题组克隆构建并于昆虫/杆状病毒表达系统中表达的禽流感病毒A/goose/Guangdong/1/96(H5N1)H5HA蛋白定量乳化后,皮下多点注射免疫SPF级BALB/c雌性小鼠,免疫后产生了H5HA特异抗体,并在三免前后达到并保持较高水平.用致死剂量的HPAIVH5N1攻击小鼠,免疫组小鼠提供了100﹪的保护力,而对照组小鼠先后发病且死亡.
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本文通过试验,测定鸡新城疫、禽流感(H5+H9亚型)二联灭活疫苗(LaSota+DG03+SS株)的免疫效力,结果表明疫苗安全、无应激;免疫抗体产生快,免疫后7天即产生较高水平的抗体;抗体水平高,免疫后21天三种抗体平均水平均达10Log2以上;整齐度好,个体间离散度及产生的三种抗体水平差异均较小;对禽流感H5亚型强毒的攻击有良好的保护力.
目的：研究流感病毒复合多表位核酸疫苗的构建及其表达产物的抗原性.方法：根据各表位基本独立的要求,结合计算机分析,以H3、H9亚型流感的HA抗原表位,H5、H7亚型的HA全基因,流感病毒的其它主要抗原(NP、NA、M)表位基因为基础,再附以Kozak序列和适当的酶切位点,设计并合成一段长765bp的复合多表位基因Epi,将其克隆入真核表达载体pRIEneo,构建重组质粒pRI-Epi;将多表位抗原基
禽流感是一种主要感染禽类的烈性传染病,能引起巨大的经济损失,该病也能传染人.基于禽流感病毒高致病性、强变异的特点,本文拟通过特异性的扩增核蛋白基因,鉴定A型流感病毒的存在,在此基础上,进行HA全基因序列的RT-PCR扩增,并结合测序,通过序列的比对来进一步分析其致病性及亚型,以期能更有效地控制本病.
本文利用原位TUNEL方法对H5亚型AIVSZ株诱导鸡组织器官的细胞凋亡情况进行了研究.用1×105EID50的AIVSZ株经点眼滴鼻方式途径攻击4周龄的非免疫石岐杂鸡,同时设立正常鸡胚尿囊液经相同途径接种非免疫鸡为对照.结果发现:与对照组相比,PI36h时,AIVSZ株不仅诱导攻毒组鸡的心、肝、肺、肾和胰腺等重要器官出现显著的细胞凋亡(P＜0.01),而且还诱导法氏囊、胸腺和脾等鸡的重要免疫器官
本文将运送H5亚型禽流感病毒DNA疫苗重组减毒鼠伤寒沙门氏菌以1010CFU剂量口服接种1日龄SPF雏鸡,结果表明重组菌对雏鸡具有良好的安全性.将重组菌SL7207(pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-HA)以2×109CFU的剂量两次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,同时,将重组菌分别与pVAX1-IFN-γ或pVAX1-IL2(200μg/只)联合免疫,通过测定小肠黏膜抗体效价,
当前,我国养殖业(畜牧养殖/水产养殖等)已时入一个快速增长的时期,2004年,全国畜牧养殖生产心管受到了禽流感的影响,仍然实实现了新的突破,全年全国肉类总产量增幅达4﹪以上,奶类产量断续保持两位数增长,禽蛋产量与去年基本持平或略有增长;同样我国水产养殖总量已占到了全球总量的73﹪,成为世界绝对的水产养殖第一大国.尽管我国畜牧养殖总量大,但平均规模小,全国生猪、肉牛的规模饲养率只有30﹪,西部个别牧
鸽圆环病毒(pigeoncircovrius,PiCV)是圆环病毒科的一个成员,是一种免疫抑制性病原.圆环病毒感染的鸽主要表现为昏睡、嗜眠、厌食、体重减轻,呼吸性窘迫等症状.用PCR法从浙江杭州某鸽养殖场检测并克隆到2株鸽圆环病毒全基因组序列.经测序表明,浙江PiCV-zj1及PiCV-zj2基因组序列全长均为2039bp.DNAStar软件分析表明,浙江株鸽圆环病毒与已发表的鸽圆环病毒序列同源性
本文根据Genebank中已发表的鸡IL-18基因序列设计引物,应用RT-PCR技术从IBV攻击的鸡脾细胞总RNA中扩增得到鸡IL-18成熟蛋白基因,将其克隆到PMD18-T载体中,进行序列测定,结果发现:该克隆的cDNA全长513bp,编码170个氨基酸.将该基因经HindⅢ和KpnⅠ双酶切后,插入同样经HindⅢ和KpnⅠ双酶切真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建真核表达质粒,研制出分子