【摘 要】
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目的:构建入水通道蛋白4(AQP4)表达载体,检测视神经脊髓炎患者血清中抗AQP4抗体.方法:从人胶质母细胞瘤中提取RNA,通过RT-PCR获得目的片段即人AQP4.将目的片段克隆到慢病毒
【机 构】
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首都医科大学宣武医院神经内科,北京100053
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目的:构建入水通道蛋白4(AQP4)表达载体,检测视神经脊髓炎患者血清中抗AQP4抗体.方法:从人胶质母细胞瘤中提取RNA,通过RT-PCR获得目的片段即人AQP4.将目的片段克隆到慢病毒表达载体(iDUET101,tetO.EF.GFP.PGK.Hygro)中,转化感受态Hb101菌株(TaKaRa)进行扩增;挑取阳性克隆菌落提取质粒,测序鉴定;包装病毒,转染HEK293-T细胞;细胞免疫荧光方法初步检测视神经脊髓炎(NMO)患者血清中抗AQP4抗体.
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