【摘 要】
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目的探讨m~6A甲基化转移酶METTL3在人膀胱癌细胞中的表达情况及其功能,明确METTL3在环境致癌物氯化镉诱导的人膀胱上皮细胞恶性转化模型中所起的作用,为膀胱癌RNA甲基化表观
【机 构】
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南方医科大学公共卫生学院毒理学系; 中山大学附属第一医院转化医学中心; 暨南大学医学院公共卫生与预防医学系;
【基金项目】
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国家自然科学基金(81473014,81472999,81772699);广东省自然科学基金重点项目(2015A030311038);广东省“百千万工程”青年拔尖人才(87316004)
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目的探讨m~6A甲基化转移酶METTL3在人膀胱癌细胞中的表达情况及其功能,明确METTL3在环境致癌物氯化镉诱导的人膀胱上皮细胞恶性转化模型中所起的作用,为膀胱癌RNA甲基化表观遗传调控研究奠定新的理论基础,并为其RNA表观遗传防治镉引起的化学致癌提供新的策略。方法运用Western blot技术检测人膀胱癌细胞系中METTL3的表达情况;利用慢病毒包装系统构建METTL3稳定过表达细胞株,利用CRISPR/Cas9技术构建METTL3缺陷型稳定细胞株,检测过表达和敲除METTL3基因对细胞表型的影响;构建氯化镉诱导的过表达METTL3恶性转化细胞模型,检测细胞表型变化。结果 METTL3基因在人膀胱癌细胞中显著高表达(P<0.05);成功构建METTL3稳定过表达及缺陷型细胞株,与对照组相比,过表达METTL3基因后膀胱正常上皮细胞增殖、迁移能力增强,凋亡减少(P<0.05),敲除METTL3基因后膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭能力减弱,凋亡增多(P<0.05);成功构建氯化镉诱导的过表达METTL3恶性转化细胞模型,过表达METTL3基因后恶性转化细胞增殖、迁移、侵袭能力均显著增强(P<0.05)。结论 m~6A甲基化转移酶METTL3在人膀胱癌细胞中高表达,可促进膀胱癌细胞生长、增殖、转移和侵袭,抑制肿瘤细胞凋亡。METTL3可促进环境致癌物氯化镉诱导的人膀胱上皮来源细胞的恶性转化。
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