【摘 要】
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根据GenBank中登录的新型猪细小病毒(PPV4)全基因组序列，针对结构蛋白VP2基因序列设计合成特异性引物及TaqMan探针，以VP2克隆质粒为标准品，通过对探针浓度、引物浓度、dNTP浓度、镁离子浓度以及退火温度进行调整，建立了用于检测PPV4的TaqMan荧光定量PCR。结果显示，该方法在6.73×107copies/μL-6.73×102copies/μL范围内线性关系良好，相关系数为0
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所传染病防治研究室 上海 200241 中国农业科学院上海兽医研究所传染
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会
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根据GenBank中登录的新型猪细小病毒(PPV4)全基因组序列，针对结构蛋白VP2基因序列设计合成特异性引物及TaqMan探针，以VP2克隆质粒为标准品，通过对探针浓度、引物浓度、dNTP浓度、镁离子浓度以及退火温度进行调整，建立了用于检测PPV4的TaqMan荧光定量PCR。结果显示，该方法在6.73×107copies/μL-6.73×102copies/μL范围内线性关系良好，相关系数为0.998;最低检测限为6.73x101copies/μL;用该方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪细环病毒和猪源牛病毒性腹泻病毒均为阴性;批内及批间变异系数均低于2％。用建立的荧光定量PCR方法对301份临床病料感染情况进行检测，结果首次在我国猪群中检测到PPV4，阳性率为3.32％，而普通PCR检出率仅为2.66％，且两种方法的符合率为100％。结果表明，建立的检测方法为PPV4的检疫，分子流行病学调查以及敏感细胞的筛选等提供了新的快速检测技术.
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