锯缘青蟹特异性过敏原的研究

来源 :中国生物工程学会生命科学与生物技术前沿学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gjb
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为了研究锯缘青蟹(Scylla serrata)特异性过敏原,首先从锯缘青蟹肌肉中提取可溶性蛋白质,利用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离。以过敏患者阳性血清和正常人阴性血清作对照,通过Western blot鉴定出分子量为14.3kDa的蛋白为锯缘青蟹的特异性过敏原。然后用SephadexG75凝胶过滤层析和DEAE-52离子交换层析纯化出该过敏原,再经MALDI-TOF/TOF-MS检测,利用Blastz在线分析确定该蛋白为血蓝蛋白的亚基,经Clustal W分析该蛋白的多肽片段序列和可口美青蟹(Callinectes sapidus)、邓杰内斯蟹(Cancer magister)、加州龙虾(Panulirus interruptus)、艾氏真蟹(Carcinus aestuarii)的血蓝蛋白亚基序列有很高的同源性,经Prosite数据库检索后发现肽段1和肽段2有酪蛋白激酶磷酸化位点和蛋白激酶C磷酸化位点,是过敏原参与机体反应的重要活性位点。
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