蛋白酶A是一种存在于酵母液泡中的非金属蛋白酶,是哺乳动物组织蛋白酶D的同源物,能够催化细胞内蛋白质水解,参与多种酶的转录加工和成熟过程。近年来研究者们发现蛋白酶A也参与了酵母细胞的凋亡过程。白桦脂酸是一种具有抗HIV、抗炎等多种生物活性的羽扇三萜烯。它能够选择性诱导肿瘤细胞凋亡并且不损伤正常的细胞,是一种极具潜力的抗肿瘤化合物。我们选用白桦脂酸作为外源刺激物,研究白桦脂酸与蛋白酶A在酿酒酵母中的交互作用。本文采用了正常的单倍体酵母菌株和蛋白酶缺失的菌株进行实验,旨在探讨蛋白酶A在白桦脂酸诱导酿酒酵母凋亡过程中的作用。方法：采用细胞兰试剂盒测定白桦脂酸处理后酵母细胞的活力；采用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测白桦脂酸处理酵母细胞后的凋亡率；采用透射电镜(TEM)观察酵母的内部细胞器结构是否发生变化；采用dihydroethidium (DHE)检测酵母细胞内的ROS产生；最后采用荧光实时定量PCR(RT-PCR)检测Yca1,Aif1等凋亡基因表达量的变化。结果：细胞兰活力试验表明白桦脂酸处理后蛋白酶A敲除组酵母细胞活力明显下降,细胞存活率显著降低；流式细胞术检测Annexin-V/PI双染发现与正常菌株相比蛋白酶A敲除细胞出现更多凋亡细胞；透射电镜观察酵母细胞器结构,发现蛋白酶A敲除后,经过白桦脂酸处理细胞的损伤程度更加严重；同时,相同的白桦脂酸处理时间,蛋白酶A敲除组细胞内ROS的产生更多；并且凋亡基因Yca1,Aif1等的表达量也有明显变化。结论：白桦脂酸处理酵母细胞后,会抑制酵母细胞的活性,并且通过作用于线粒体,释放凋亡因子诱导细胞凋亡。蛋白酶A可能通过水解受损伤的蛋白质,保护酵母细胞,起到抗凋亡的作用。