【摘 要】
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凋亡是生物学过程中主要的组成部分之一,它在许多生物体的细胞增殖调控、组织器官重建等发挥着重要的功能。本研究中,我们使用凋亡常用的检测方法TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling)和DAPI双染,定性分析日本血吸虫14天童虫虫体细胞凋亡,Annexin V-FITC/propidium i
【机 构】
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扬州大学兽医学院,225009;中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点实验室,200241
【出 处】
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上海市畜牧兽医学会2013年学术年会
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凋亡是生物学过程中主要的组成部分之一,它在许多生物体的细胞增殖调控、组织器官重建等发挥着重要的功能。本研究中,我们使用凋亡常用的检测方法TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling)和DAPI双染,定性分析日本血吸虫14天童虫虫体细胞凋亡,Annexin V-FITC/propidium iodide (PI) (Annexin V/PI)定量分析14天和23天日本血吸虫虫体细胞的早期、晚期凋亡和死亡细胞比例。保守功能域比对分析表明商品化哺乳动物Caspase 3和Caspase 7活性检测试剂盒可用于检测日本血吸虫虫体Caspase 3和Caspase 7活性。日本血吸虫不同期别虫体Caspase 3/7活性检测表明,童虫期虫体的活性高于成虫,雄性成虫的活性高于雌性成虫,相应的结果得到qPCR验证。研究还发现,广谱的凋亡抑制剂caspase peptide inhibitor (Z-VAD-FMK)对日本血吸虫虫体的Caspase 3/7活性有着很好的抑制作用。上述结果为深入研究日本血吸虫凋亡的发生机制及其作用方式提供了良好的检测平台。通过对不同期别日本血吸虫凋亡相关基因的qPCR研究和分析,进一步优化了日本血吸虫存在的凋亡通路,为深入研究日本血吸虫与宿主的相互作用及筛选抗日本血吸虫药物靶标提供基础。
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