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目的:分离兔髓核脊索细胞(NC)及骨髓间充质干细胞(MSC),通过非接触共培养探讨脊索细胞对MSC细胞表型的影响.方法:取4~6周龄新西兰兔8只,取胸腰段脊柱的髓核,用密度梯度离心提取脊索细胞,同时取其股骨骨髓用FICOLL液分离,光镜观察脊索细胞和MSC等比例(1:1)非接触共培养条件下的生长情况.对非接触共培养(1:1)和单独培养的MSC行免疫组化及RT-PCR、Western-blot检测MSC的细胞表型的改变情况.结果:原代脊索细胞呈圆形或椭圆形,细胞体积大,细胞增殖不明显.MSC呈梭形贴壁生长,呈三角形或梭形,旋涡状排列,两端呈尖性突起,细胞折光性较差.非接触共培养后,行甲苯胺蓝染色MSC单独培养组呈阴性,与NC非接触共培养的MSC组呈阳性.Ⅱ型胶原免疫组化MSC单独培养组呈阴性,与NC非接触共培养的MSC组呈阳性呈阳性.通过RT-PCR、Western-blot在基因及蛋白水平检测后发现:非接触共培养的MSC组其Ⅱ型胶原及蛋白聚糖的表达明显增多,与对照组有显著性差异(p<0.05).结论 在非接触共培养条件下脊索细胞可以诱导MSC向类软骨细胞方向分化,为组织工程化髓核的种子细胞筛选提供新选择.