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目的 慢性牙周炎是心血管疾病的独立危险因素,本研究旨在探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-lps)对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和矿化的影响,为临床牙周疾病及心血管疾病的相互影响和防治提供依据.方法:本研究采用组织块贴壁法体外培养大鼠VSMCs,传代培养并采用免疫组化法鉴定.将使用不同浓度Pg-lps(0、1、10、100、1000、10000ng/ml)培养液体外培养的VSMCs分为六组,采用CCK8试剂盒检测各组VSMCs的增殖速度.并采用Pg-lps(0、1ng/ml、 1ug/ml)三组培养,采用碱性磷酸酶试剂盒检测其ALP活性.采用Pg-lps(0、1ng/ml、1ug/ml)、地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠诱导VSMCs成骨分化,并设对照组;培养21 d后进行钙化结节茜素红染色,并进行矿化结节定量检测.采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别观察Pg-lps对VSMCs骨向分化相关基因碱性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白(BSP)以及骨桥蛋白(OPN) mRNA表达变化.结果:CCK-8结果示:1天后(1-10000ng/ml)Pg-lps均显著促进VSMCs增值,并随时间的延长,促进作用越明显.ALP检测结果示:(1ng/ml、1ug/ml) Pg-lps在(0.5-4天)均显著促进VSMCs的ALP活性,随着时间的延长促进作用更明显,且4天时1ug/ml较1ng/ml对ALP活性促进作用更显著.茜素红染色及矿化结节定量结果示:矿化诱导组较普通培养组VSMCs矿化结节量明显增多,且在不同培养下,(1ng/ml、1ug/ml)Pg-lps均促进其矿化结节的形成.RT-PCR结果示:ALP在矿化诱导组较普通培养组在1、2和7天明显增高,且在不同培养下(1ng/ml、1ug/ml) Pg-lps均促进ALP的表达;BSP在矿化诱导组较普通培养组在1天和2天时明显增高,且在不同培养下(1ng/ml、1ug/ml)Pg-lps均促进ALP的表达,第7天时,矿化诱导对照组明显高于普通培养对照组,但普通培养(1ng/ml、 1ug/ml)Pg-lps明显高于矿化诱导对照组,却与矿化诱导组(1ng/ml、1ug/ml)Pg-lps间无统计学差异;OPN在矿化诱导组较普通培养组在1天和2天时明显增高,且第2天增强更明显,第7表达增强不明显,而在1天和2天时(1ng/ml、1ug/ml)Pg-lps不同培养下均促进其表达,第7天时普通培养下(1ng/ml、 1ug/ml)Pg-lps促进其表达,而矿化诱导组反而抑制其表达.结论:Pg-lps能促进VSMCs的异常增殖;还可能通过促进VSMCs的ALP活性及相关矿化基因ALP、BSP和OPN的表达而影响其矿化过程,加速VSNCs的矿化;进而提示Pg-lps对心血管疾病的发生发展可能有重要作用,并表明牙周病对心血管疾病的发生发展有一定的促进作用,临床上应该控制牙周优势菌浓度,降低其对心血管疾病的影响.