治疗药物监测与酶放大免疫测定法

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治疗药物监测(Therapeutic Drug Monitoring,TDM)是在转向药学技术服务,保障患者用药安全、合理、有效的背景下发展起来的一个较新的临床药学分支【1】,是提高医疗服务质量,进行科研与临床相结合的有效途径。TDM的兴起和发展是与现代分析技术的飞跃发展分不开的。常用的分析方法及特点如下:(1)光谱法包括可见分光光度法、紫外分光光度法和荧光分光光度法;该法检测成本低,但所需样本量大、灵敏度低、干扰因素多、专属性也不好【2】。2)色谱法包括薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱-质谱联用法(LC-MS)等;该法灵敏度高,专一性强,但需要进行方法学建立而且样本需预处理,费时、费力。(3)免疫分析法包括荧光偏振免疫分析(FPIA)、酶放大免疫分析(EMIT)、放射免疫分析(RIA)等;该法快速,灵敏度高,无需前处理,操作简单,适合批量和个别样品,尤其急诊样品的测定。免疫分析法属于最新一代TDM分析方法,本文重点介绍其中的EMIT法。EMIT由美国SYVA公司最先研制成功【3】,通过竞争法原理检测样品中的药物。用葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)标记的EMIT法,是利用标记在药物上的G-6-PDH能将6-磷酸葡萄糖(G-6-P)氧化成6-磷酸葡萄糖酸,在整个氧化反应过程中须有辅酶Ⅰ(NAD)参加,NAD本身被还原成还原型辅酶Ⅰ(NADH),同时吸收光谱发生改变。利用药物浓度与340 nm处吸收度的变化关系建立标准曲线,测定样品【4】。尽管酶放大免疫分析技术,操作简单,迅速,但对温湿度等环境条件及反应时间的要求较为严格。在我院日常治疗药物浓度监测中,发现温度保持在22-26度,湿度保持在28%-35%,较为适宜,结果较为稳定;反应时间建议不要超过10分钟。因此在使用EMIT进行治疗药物浓度监测时,建议始终保持实验室温湿度恒定,以确保样本全流程健康,所得结果准确、可靠。
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