猫细小病毒间接ELISA方法的建立

来源 :中国北方第六届实验动物科技年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sprach
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实验首先用辛酸-硫酸铵法和分子筛层析法纯化得到猫IgG,然后添加福氏佐剂免疫新西兰兔,通过双向琼脂扩散试血,效价高达64后采血分离兔血清。用辛酸.硫酸铵法和亲和层析法纯化兔IgG,改良过碘酸钠法酶标,制备酶标兔抗猫抗体。对间接ELISA一系列的条件进行优化,建立FPV抗体检测的间接ELJSA方法。实验结果通过与FPV血凝抑制试验的对比,证明建立的方法科学有效,高效灵敏。该方法不仪可以应用于免疫学研究、血清流行病学调杳,同时为实验动物猫的标准化提供方法。
其他文献
目的:通过用纯化的猫血清IgG,制备兔抗猫IgG酶标抗体,并用于猫血清中抗原特异性IgG的检测。方法:采用辛酸.硫酸铵法和Sephadex G-150分子筛层析法纯化猫血清IgG,免疫新西兰兔制备兔抗猫IgG并进行亲和层析纯化,改良过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶,获得兔抗猫IgG的酶标抗体。结果:以纯化的猫血清IgG(纯度大于93%)免疫新西兰兔获得相应的兔抗猫IgG,经亲和层析后,琼脂扩散试验效价
本实验室从长春地区送检的猫脾脏中分离保存的一株猫细小病毒,命名为CC-1株,对此毒株提取病毒基因组DNA,根据Genbank中收录的猫细小病毒(CU-4株)基因组,设计一对包含NS1全基因的PCR引物,对其基因进行整体扩增。将扩增产物提纯后克降入pMD18-T载体,通过酶切、PCR和测序进行验证。结果表明,该毒株NS1基因序列长度约为2.35kb,该基因的阅读框总长为2007bp,编码668个氨基
目的:研究刺五加注射液对大鼠血液及血液生化学指标的影响作用。方法:设高、中、低3个剂量组和1个对照组,每天给药两次。连续给药2个月后每组选择12只大鼠测定血液及血液生化学指标;停药后继续观察2周并对剩余大鼠测定血液及血液生化学指标。结果:给药2个月后大鼠血液学检杳,高剂量组和中剂量组的。RBC计数和血小板计数明显增加(P0.05)。停药2个星期后大鼠血液学检查,高剂量组和中剂量组的HB和WBC计数
目的:分析猫细小病毒CC-1株VP1基因的序列,并与国内外代表性的毒株进行比较。方法:根据CenBank登录的猫细小病毒(CU-4)VP1基因序列,设计了一对引物用PCR技术对VP1基因进行整体扩增,将扩增产物纯化后克隆人PGM—T载体,通过酶切、PCR和测序进行验证。结果:测序拼接得出VP1基因的序列长度约为2306bp,该基因的ORF总长为2184bp,编码727个氨基酸,应用DNAstar软
目的:研究蜂胶对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法:大鼠喂高脂高糖饲料4W后腹腔注射链尿佐菌素(STZ)造模。将造模成功大鼠随机分成两组:2型糖尿病组(A组,继续喂养上述高脂高糖饮食)和加蜂胶喂养组(B组,另加蜂胶喂养12W,0.9gd-1只-1)。另设正常大鼠对照组(C组,仅喂基础饲料)。分别于4、8、12 W时测血糖、血肌酐、尿素氮、尿量、尿蛋白定量;处死大鼠后取左肾做病理切片光镜下观察肾组织
目的:被动皮肤过敏试验(PCA)中,选择合理的抗体制备时间、稀释倍数、被动致敏激发时间。方法:将致敏大鼠的血清皮内注射于正常豚鼠,使之被动致敏。然后,向抗原液内混入伊文思兰(Evans)色素再注射到静脉内,注入的染料可渗出于皮丘,形成蓝斑。测定蓝斑的直径,作为反应强度的指标。通过利用SPSS13.0统计分析软件,对实验结果数据进行统计学分析得出结论。结果:(1)不同时间致敏血清的各组间差异不显著(
采用骨髓嗜多染红细胞微核技术对无毛小鼠进行骨髓微核实验研究。结果表明,无毛小鼠嗜多染红细胞自发微核率与正常昆明小鼠无显著性差异(P>0.05)。表明无毛小鼠与昆明小鼠自发微核率相似。
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猫科动物具有极敏感的神经系统,是适于脑神经生理和神经生物学研究的极好实验动物。猫的呕吐反应灵敏,呼吸道黏膜对气体或蒸汽反应灵敏。作为一种重要的实验动物和经济类宠物,猫的实验生产规范化、标准化日趋重要。鉴于此,本文从猫杯状病毒(FCV)的生物学特性、复制与组装等方面对猫杯状病毒基因疫苗的研究进展进行了综述。
本文论述了实验动物信息学的研究内容和应用前景,探讨了国内外实验动物信息化的现状及启示,介绍了网络上一些实验动物资源,并初步构思了实验动物信息平台的建设。