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目的:通过观察电针预处理对磷脂酰肌醇3激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)通路的变化以及该通路抑制剂对电针预处理的脑保护的影响,探讨电针预处理诱导脑缺血耐受的可能机制。方法:实验一雄性SD大鼠40只,随机分为5组(n=8):Sham组、MCAO组、EA+MCAO组、LY294002+EA+MCAO组、DMSO+EA+MCAO组。LY294002组和DMAO组在MCAO模型前1h经侧脑室注射药物。LY294002稀释方法:DMSO稀释其至50mM(15μg/μl),然后PBS稀释至10mM(3μg/μl);DMSO注射液:相同容积的DMSO加入相同容积的PBS,DMSO终浓度20%。注射位置及深度:Bregma点旁开0.9㎜,向后1.5㎜,深度0.38㎜造模前1h侧脑室注射,给药量10μl(30μg),给药速度1μl/min,静置3min。缓慢出针,缝合。动物麻醉苏醒后放回鼠笼,自由饮食。脑缺血再灌注后24h,由一名不了解分组情况的观察者依据Garcia评分法,评估记录神经功能学评分。神经功能学评分完成后,断头取脑,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)溶液检测脑梗死容积,用图像处理软件(AdobePhotoshop7.0)计算梗死面积(粉红色区域为正常脑组织,白色区域为梗死区),为减少缺血侧脑组织水肿对实验结果的影响,采用校正的脑梗死体积比表示,校正的脑梗死体积百分比=(对侧脑组织体积-缺血侧正常脑组织体积)÷对侧脑组织体积×100%。实验二雄性SD大鼠24只,随机分为3组(n=8):Sham组、MCAO组、EA+MCAO组。Sham组不做任何处理;MCAO组采用线栓法单侧阻断大脑中动脉,120min后恢复灌注,制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO模型);EA+MCAO组在百会穴重复电针刺激5天(刺激条件:疏密波、频率2/15Hz、电流强度1mA,30min/次,1次/d),24h后行MCAO术;分别于缺血前即刻、再灌后2h、再灌后24h应用Western Blot方法检测大鼠缺血侧皮层中pAkt的表达含量的变化。结果:电针预处理使大鼠神经行为学评分增高,脑梗死体积比降低(P<0.05);可上调Akt磷酸化水平,I/R2h达高峰(P<0.05)。侧脑室注射PI3K/Akt抑制剂LY294002,拮抗电针预处理的脑保护作用(P<0.05)。结论:电针预处理增加Ak(tSer473)磷酸化水平,在缺血再灌注早期上调PI3K/Akt通路可能是诱导大鼠脑缺血耐受的产生的主要机制。