【摘 要】
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目的 流感神经氨酸酶激发的免疫反应对流感有保护作用。然而,流感疫苗中神经氨酸酶的含量并未规定。因此,建立简单的神经氨酸酶含量测定的方法是必要的。由于流感病毒的高突变率,根据毒株的变化制备相应的抗体显然费时费力。本研究试图建立针对甲型流感病毒神经氨酸酶的通用抗体,一劳永逸的解决抗体问题。方法 通过生物信息学方法对流感病毒数据库中神经氨酸酶基因进行序列分析,寻找保守序列并合成多肽。将多肽与载体蛋白匙孔
【机 构】
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中国药品生物制品检定所,北京100050 加拿大卫生部生物制品研究中心
【出 处】
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2010年中国药学会大会生物制品研发新进展论坛暨生物制品专业委员会筹备会议
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目的 流感神经氨酸酶激发的免疫反应对流感有保护作用。然而,流感疫苗中神经氨酸酶的含量并未规定。因此,建立简单的神经氨酸酶含量测定的方法是必要的。由于流感病毒的高突变率,根据毒株的变化制备相应的抗体显然费时费力。本研究试图建立针对甲型流感病毒神经氨酸酶的通用抗体,一劳永逸的解决抗体问题。方法 通过生物信息学方法对流感病毒数据库中神经氨酸酶基因进行序列分析,寻找保守序列并合成多肽。将多肽与载体蛋白匙孔蓝蛋白(KLH)偶联,多次皮下免疫家兔后取脾制备单克隆抗体。结果 序列分析发现神经氨酸酶N端12个氨基酸与头部9个氨基酸高度保守,偶联多肽经四次免疫后效价达1∶80,000,成功制备杂交瘤细胞与单克隆通用抗体。以免疫印迹方法证明两通用抗体均能与流感病毒N1～N9亚型神经氨酸酶特异性反应。结论 通过寻找保守蛋白序列并偶联到载体上,免疫家兔获得了针对甲型流感病毒神经氨酸酶的通用抗体。
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