以减毒鼠伤寒沙门菌ΔcrpΔasdSL1344作为DNA疫苗载体，构建不含抗性基因的真核互补质粒pcD-asd，构建减毒鼠伤寒沙门菌ΔcrpΔasdSL1344（pcD-asd）平衡致死系统，为开发新型重组减毒沙门菌口服活疫苗载体奠定基础。本研究以pcDNA3.1-Zeo(+)质粒为基础，用沙门菌asd基因替代其氨苄抗性基因Amp，构建不含抗性基因的真核互补质粒pcD-asd；再将互补质粒pcD-asd电转入沙门菌ΔcrpΔasdSL1344，构建ΔcrpΔasdSL1344（pcD-asd）平衡致死系统，并进一步研究该系统递呈外源抗原的能力及其生物学特性。结果证实该系统不仅解决了外源基因表达不稳定和耐药性的问题，而且解决了原核表达系统缺乏翻译后蛋白加工修饰的问题。该重组菌有潜力作为新型口服活疫苗候选菌株，为进一步开发不携带抗性标记的高效表达外源基因的口服活疫苗载体奠定了良好的基础。