【摘 要】
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甘蓝花药和游离小孢子培养研究进展缓慢,培养结果差异很大,多数具有价值的甘蓝材料小孢子胚产量低而不稳定,限制了该方法在甘蓝育种中的应用.供试材料为日本铁头65、日本
【机 构】
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河南省农业科学院园艺研究所,郑州450008
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甘蓝花药和游离小孢子培养研究进展缓慢,培养结果差异很大,多数具有价值的甘蓝材料小孢子胚产量低而不稳定,限制了该方法在甘蓝育种中的应用.供试材料为日本铁头65、日本绿宝石、C317等5份.材料种子在试验前一年秋季播于大田,自然越冬后于第二年春季4、5月进行培养.在开花期从供体植体花序上取3.5～4.5 mm长的花蕾,用75％酒精浸30s,0.1％HgC12消毒5 min,无菌水冲洗3次.花药采用Bs+ 13％蔗糖+0.5 g·L-1活性炭固体培养基,将花药在无菌下从花蕾中剥出,接种到培养基上；小孢子培养采用NLN+13％蔗糖+ 0.5 g·L-1活性炭液态培养基,花蕾经挤压破碎、过滤离心,收集小孢子加入NLN培养液分装至60mm×15mm培养皿中,每皿2mL,用Parafilm封口.花药和小孢子培养先放入33℃恒温培养箱中培养24 h,然后转入25℃下黑暗培养,培养30 d后统计小孢子胚数.将小孢子胚在光照下培养变绿,然后转入B5+BA0.1 mg.L-1 +NAA0.1 mg·L-1固体培养基上长成绿芽.再将幼芽转入B5+ NAA 0.1 mg·L-1生根培养基上可以生根,形成完整植株.
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