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朊病毒病是一类致死性神经退行性疾病,可在人及多种动物中发病,致死率达100%。利用Western blot技术检测脑组织中PrPsc是目前WHO和OIE推荐使用的动物和人朊病毒病确诊诊断技术,常规朊病毒病检测技术还有脑组织病理检测、免疫组化和免疫印记等,此外许多新型的检测技术也在不断地研发。在诊断技术的研发中,合格稳定的临床样本库对于诊断技术的考核十分重要。
本研究选用30只经颅内注射感染羊瘙痒因子263K的仓鼠,这些仓鼠在经过相似的潜伏期后全部出现朊病毒病的典型临床表现,并于终末期处死取脑组织,并以30只正常仓鼠作为对照,每只仓鼠脑组织分别制备10%、1%和0.5%3种浓度的匀浆,分装冷冻保存。以Western Blot方法确定脑组织匀浆中PrPsc的存在情况,并分别在建库半年和3年检测PrPsc的稳定性。经检测,30只感染仓鼠1 0%脑组织匀浆全部可检出PrPsc,1%脑组织匀浆有26份为Prpsc阳性,占总数的86.7%,另4份(13.3%)结果为阴性。30份O.5%的脑组织匀浆中19份显示Prpsc阳性,占总数的63.3%,另11份(36.7%)未检出PrPsc。半年及3年后复检,prpsc阳性检出率基本不变。所有正常仓鼠脑匀浆均为PrPsc阴性。由此建立了含有90份PrPsc阳性标本和90份PrPsc阴性样本的朊病毒病实验动物脑组织检测样本库,具有可靠的检测重复性,可满足动物和人朊病毒病诊断技术敏感新及特异性的评估和考核。