猪附红细胞体MSG1部分基因片段的全基因合成及克隆表达

来源 :中国畜牧兽医学会家畜内科学分会2009年学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:SYNJONES123
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
通过人工合成猪附红细胞体MSG1基因的编码序列,提高目的基因在大肠杆菌中的高效表达。根据GenBank注册的AM407404的544-942氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成了12条寡核苷酸片段。用PAS方法,全基因合成MSG1部分目的基因,克隆入pjet1.2/blunt载体。经测序证实正确后,构建原核表达载体pET-28c/MSG1,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,获得含重组表达质粒的转化子,IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE分析。测序、酶切鉴定等结果表明表达栽体构建成功,诱导表达后大约在16KD的位置出现明显的蛋白条带。
其他文献