【摘 要】
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<正> 获得新基因的全长编码区后,构建蛋白表达载体进行重组蛋白生产的重要步骤。针对基因克隆过程中由基因片段到全长基因的繁琐操作,以基因片段的混合物为模板,采用桥式PCR
【机 构】
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汕头大学医学院变态反应与炎症研究所;
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<正> 获得新基因的全长编码区后,构建蛋白表达载体进行重组蛋白生产的重要步骤。针对基因克隆过程中由基因片段到全长基因的繁琐操作,以基因片段的混合物为模板,采用桥式PCR特异性地扩增得到全长基因;同时针对表达载体构建过程中长引物扩增的非特异性,建立了重叠引物法对插入片段进行整理,并构建表达载体,达到了轻便快速的效果。以全长过敏原基因LCM9的克隆及其蛋白质的表达为事例对以上方法进行了说明。同时对本方法的拓展应用进行了探讨。
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