【摘 要】
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RNA干扰是外源性或内源性双链RNA诱发的mRNA水平上的基因沉默机制.RNA干扰技术具有高效性,特异性,随着研究的深入,具有广阔的前景.最近将RNA干扰应用于许多病毒性疾病的治疗研究均取得了显著的基因沉默效果,为病毒的预防和治疗开辟了一条新途径.现对RNA干扰的作用机制及其抑制猪主要病毒感染的研究进展与展望做一综述.
【机 构】
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山东省滨州畜牧兽医研究院,滨州 山东 256600
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会
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RNA干扰是外源性或内源性双链RNA诱发的mRNA水平上的基因沉默机制.RNA干扰技术具有高效性,特异性,随着研究的深入,具有广阔的前景.最近将RNA干扰应用于许多病毒性疾病的治疗研究均取得了显著的基因沉默效果,为病毒的预防和治疗开辟了一条新途径.现对RNA干扰的作用机制及其抑制猪主要病毒感染的研究进展与展望做一综述.
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将猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白第165～200位氧基酸多肽嵌合在猪细小病毒(PPV)、VP2 N端,然后重组到腺病毒pAdEasy-1表达系统中,转染HEK-293细胞,获得重组腺病毒(rAd-PPV:VP2-PCV2:Cap).IFA和Western-blotting分析分别可见特异性荧光和大小约为64 kD的特异性带.表明rAd-PPV:VP2-PCV2:Cap在HEK-293细胞中成
猪繁殖与呼吸综合症和Ⅱ型圆环病毒病对我国养猪业危害已经相当严重.本文时这两种病的诊断依据、防控措施进行了探讨,并根据中西医临床治疗理论,提出了"鸡尾酒"疗法的治疗方案,供广大兽医工作者参考.
通过流行病学调查、临床症状、病理剖检和病理组织学观察,结合对可能发生的疫病的实验室排除与检测,初步确诊这个猪场发生疫病流行是由猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟病毒混合感染造成的.通过采取一系列综合防治措施,猪场疫情得到有效控制.
2006年3月宁夏某猪场从南方某省调进野猪18头,于4月初开始出现体温升高,呼吸困难等症状,先后发病4头,死亡1头.经临床剖检和实验室病原学诊断,确诊为高致病性猪蓝耳病和细菌混合感染.
猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)可引起妊娠母猪的繁殖障碍及仔猪的呼吸道疾病及免疫抑制和持续性感染,从而导致新生仔猪发生继发感染,死亡率升高,生长发育受阻,有时可出现神经症状.2005～2007年之间吉林省某些猪场发生"猪无名高热",笔者对分离到的病毒经序列分析表明,其非结构蛋白(Nsp2)存
本文就高致病性猪繁殖与呼吸综合征的流行病学、临床症状、剖检变化、诊断与防制等相关方面进行了初步综述,以期为控制高致病性猪繁殖与呼吸综合征在我国的发生和流行提供一点资料.
经间接免疫荧光试验和RT-PCR鉴定,用Marc-145细胞从河南省不同地区送检的疑似猪繁殖与呼吸障碍综合征的病料中分离到16株猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV).扩增分离株的ORF5基因并进行序列测定.比较分析和绘制进化树.结果表明16株分离株之间的氨基酸序列同源性为88.1％-99.8％;与欧洲型LV株和美洲型VR-2332株的氨基酸序列同源性分别为54.0％-54.5％和88.1％-9
分离并鉴定了一株猪繁殖与呼吸综合征病毒,经病毒生物学特性测定、血清学试验、病毒基因鉴定,确定为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒,将其命名为JL/07/SW株.根据猪繁殖与呼吸综合征病毒VR-2332株及变异毒株的核苷酸序列,设计合成了针对NSP2变异序列以及ORF7基因的引物,并扩增出正确的序列,经测定后的序列比对后,发现该毒株为变异毒株,NSP2上缺失了30个氨基酸,而ORF7相对保守.
2007年6月份,某猪场爆发一起以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染性疾病,临诊症状主要表现为高烧、皮肤发红、怀孕母猪流产,剖检主要特征是间质性肺炎.经过病原分离,获得一株能够引起Marc-145细胞发生病变的病毒.进一步通过血清中和试验、血凝试验,RT-PCR,确定此次分离的病毒为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒.综合该病的流行病学特征.临床症状、剖检病理变化以及实验室检验,确诊该病为高致病性猪
在对东北某猪场新引入的处于隔离期的种公猪群进行PRRSV、CSFV及PRV的本底调查时,应用鉴别RT-PCR从一头表观正常的种公猪体内检测到高致病性PRRSV,分离此株病毒并对其重要结构蛋白基因GP5进行克隆测序、系统进行进化树分析.结果显示此株病毒属于美洲型PRRSV,其与高致病性PRRSV代表株(HEB1、HUB2、JXA1)的同源性分别为99％,99％和99.2％.