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目的:探讨中药对TACE术后肿瘤转移潜能的影响,揭示清肝化瘀口服液对抑制肝细胞癌细胞增殖、降低肝细胞癌细胞COX-2、VEGF表达的作用,为中药的临床研究提供试验依据。
方法:随机选取我院2006年2月至2007年2月间住院原发性肝细胞癌患者60例,其中男38例,女22例,年龄48—65岁,平均56.3±7.7岁。肝动脉化疗栓塞方法:采用Seldlinger穿刺技术,股动脉导管一次介入法进行灌注化疗栓塞。清肝化瘀口服液给药方法:介入第2天开始服用清肝化瘀口服液,每次20ml,每日2次,饭后服用。分别于介入术前1天和介入术后第4周早晨空腹静脉采集样血5mL,分装不抗凝管与枸橼酸钠抗凝管.不抗凝管低温离心(4℃,2 500 r/min,10分钟),分离血清加入抑肽酶2500kU,-30℃保存待测。枸橼酸钠抗凝管,用DEPC处理过的无菌去离子水配制的1/15 mol/L pH7.2的PBS对倍稀释后叠加于淋巴细胞分离液(比重1.077),离心(2000 r/min)20 min,分离单个核细胞并以PBS洗涤2次,调整细胞浓度为5×106/ml左右,于-80℃冰箱保存。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA法)榆测血清中VEGF水平;RT-PCR检测COX-2基因水平表达;检测两组患者治疗后肝外转移情况:CT和/或超声及胸片检查,随访观察肺、骨、脑及淋巴结的转移情况。
结果:经清肝化瘀口服液联合介入治疗后患者外周血中VEGF表达量为207.49+93.22。结果显示清肝化瘀口服液联合治疗可有效降低介入治疗后增高的VEGF(P<0.05)。经清肝化瘀口服液联合介入治疗后患者外周血有核细胞中COX-2表达阳性率为47.77%,明显低于单纯TACE治疗组的55.69%(P<0.05)。同时表达最也低于单纯TACE治疗组。
结论:TACE+中药组外周血中VEGF及COX-2表达显著降低,说明TACE联合应用清肝化瘀口服液在防止肿瘤转移中具有重要作用。