【摘 要】
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目的:本研究探讨Th17和Tregs平衡失调与大鼠根尖周炎的炎症反应及牙槽骨 破坏的关系。方法:选取5周龄雄性Wistar大鼠(n=20),实验组用球钻将下颌第1磨牙开髓,根管锉清理牙髓,髓腔暴露于口腔中,14d、28d后断颈处死。以未开髓的上颌第1磨牙作为对照组。取上下颌骨,采用Micro-CT观察根尖病损的形成情况;部分标本固定,脱钙,冰冻切片,组织学方法观察根尖病损的特点,采用抗CD68、l
【机 构】
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首都医科大学口腔医学院牙体牙髓科 首都医科大学基础医学院免疫系
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目的:本研究探讨Th17和Tregs平衡失调与大鼠根尖周炎的炎症反应及牙槽骨 破坏的关系。方法:选取5周龄雄性Wistar大鼠(n=20),实验组用球钻将下颌第1磨牙开髓,根管锉清理牙髓,髓腔暴露于口腔中,14d、28d后断颈处死。以未开髓的上颌第1磨牙作为对照组。取上下颌骨,采用Micro-CT观察根尖病损的形成情况;部分标本固定,脱钙,冰冻切片,组织学方法观察根尖病损的特点,采用抗CD68、la和抗TCR αβ的单克隆抗体进行免疫组化,用酶组织化学染色(TRAP染色)进行破骨细胞染色;部分标本根尖组织提取总RNA,RT-PCR及荧光实时定量PCR方法定量检测根尖组织中Th17相关细胞因子RORyt、IL-17、IL-23、IL-21、IL-1β、IL-6,以及Tregs相关因子Foxp3、IL-10、TGF-β的mRNA表达情况。结果:Micro-CT显示,14d和28d时实验组有明显的根尖病损形成;组织学结果表明,14d时根尖病损呈急性炎症特点,而28d时根尖病损呈慢性炎症特点,14d时TRAP染色阳性的破骨细胞显著多于28d;免疫组化结果表明,14d和28d时根尖病损有均有大量CD68阳性的巨噬细胞、Ia阳性的抗原提呈细胞和散在的TCR α β阳性T细胞浸润;RT-PCR及实时定量PCR结果显示,14d和28d时实验组根尖组织中Th17相关细胞因子RORyt、IL-17、IL-23、IL1β、IL-6的mRNA表达显著高于对照组,而Tregs相关因子Foxp3、IL-10、TGF-β的mRNA表达在14d时无明显变化,28d时Foxp3、IL-10、TGF-β的mRNA的表达显著增高。结论:Th17可能主要参与根尖周炎的骨吸收,而Tregs的调节可能导致病损呈慢性过程。
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