【摘 要】
：
将二乙酰羧基荧光素-琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)结合流式细胞术的淋巴细胞增殖试验结果与传统的检测针对有丝分裂原的T淋巴细胞增殖的结果有良好的相关性，且省时省力，可避免传统的[H3] TdR掺入法的放射性污染，还可对特殊淋巴细胞亚群设门，在体内/体外追踪某个亚群的淋巴细胞增殖，并研究细胞分化/调亡相关活化分子和(或)细胞内蛋白的表达.CFDA-SE亦可用于检测细胞混合样本中的死亡细胞，即先用CFD
【机 构】
：
四川大学华西公共卫生学院四川省食品安全监测风险评估重点实验室,四川成都610041
论文部分内容阅读
将二乙酰羧基荧光素-琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)结合流式细胞术的淋巴细胞增殖试验结果与传统的检测针对有丝分裂原的T淋巴细胞增殖的结果有良好的相关性，且省时省力，可避免传统的[H3] TdR掺入法的放射性污染，还可对特殊淋巴细胞亚群设门，在体内/体外追踪某个亚群的淋巴细胞增殖，并研究细胞分化/调亡相关活化分子和(或)细胞内蛋白的表达.CFDA-SE亦可用于检测细胞混合样本中的死亡细胞，即先用CFDA-SE标记靶细胞，再用可标记死亡/调亡细胞的染料PI或7-AAD标记混合样本，以检测死亡的靶细胞，此技术可定量、敏感、客观的检测受试物对靶细胞的细胞毒作用.已有研究将其应用于人外周血淋巴细胞、大/小鼠淋巴细胞的细胞杀伤活性检测.还有研究使用CFDA-SE/7-AAD双染和与细胞杀伤能力的传统测试方法51 Cr释放法同时测定大鼠CD95介导的细胞杀伤能力，结果显示两法所得结果具有较好的相关性，且CFDA-SE/7-AAD双染法更为灵敏.另一项研究应用CFDA-SE/PI染色测定了从大鼠外周血中分离出的NK细胞的杀伤活性，结果表明该方法准确性较好，可将其应用于常规的免疫毒理学动物试验中.本实验室近期研究中已证实以一定浓度CFSE-DA染料负载淋巴细胞，其荧光染色稳定、不易渗漏沾染，且在所选剂量范围内不影响细胞增殖；并将CFDA-SE染色方法测定淋巴细胞增殖及NK细胞杀伤活性的方法结合应用于食品中农药残留的免疫抑制作用评价的动物实验中，结果表明该方法与目前国内常用的MTT方法所得结果的一致性较好，且更为直观灵敏.
其他文献
Background/Aims Natural killer cells (NK)-expressing TRAIL have capacity to mediate hepatocyte apoptosis in HBeAg-negative chronic hepatitis B (CHB) patients with liver flare; however, it remains unkn
Interleukin7 (IL)-17-mediated immune response has been shown to play a critical role in inflammation-associated disease.However, its role in the pathogenesis of chronic hepatitis B virus (HBV) in paed
Background & Aims Our previous Conclusions showed that the knockdown of woodchuck hepatitis virus (WHV) by RNA interference (RNAi) led to upregulation of interferon stimulated genes (ISGs) in primary
目的 研究不同品系大小鼠的食物利用率.方法 选择SPF级Wistar,SD,KM, ICR, BALB/c不同品系大小鼠100只,每品系20只,雌雄各半.饲喂30 d,自由采食及饮水,每48 h更换饲料及垫料.饲料处理：每次称量并记录饲料的添加量及剩料量,每次称量前饲料均在65℃干燥箱干燥2h,自然冷却后称量.垫料处理：每次称量并记录垫料的添加量及48 h后垫料的重量(饲喂48 h后的垫料需将大小
目的 观察槲皮素-3-o-新橙皮糖苷对L6肌管细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗；脂肪酸消耗以及对PPARα；PPARγ； GLUT4表达量的调节作用及其作用机制.方法 以250 μmol·L-1的脂肪酸诱导形成L6肌管细胞胰岛素抵抗模型,以槲皮素-3-o-新橙皮糖苷干预24 h后,葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖消耗量,气相色谱法检测脂肪酸消耗量,Wester蛋白质印迹法检测细胞中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4
目的 研究竹叶黄酮中的代表性单体物质荭草苷、异荭草苷、绿原酸和阿魏酸对CHO细胞线粒体功能的影响,以了解四种单体都对线粒体的损伤作用及作用差别,并从中找出早期细胞损伤指标,为生物活性物质的毒理学研究及单体活性物质的开发提供科学依据.方法 选用正常中国仓鼠卵巢细胞(CHO),采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用回归中概率单位计算IC50值.以IC50、1/2IC50值、1/4IC50值、1/8 I
目的 采用不同氧化损伤模型中研究咖啡酸苯乙酯(CAPE)和维生素E是否存在协同抗氧化作用.方法 采用化学发光模型、微粒体脂质过氧化模型及伽马射线照射所致的L929细胞氧化损伤模型,在体外及生物体系中研究CAPE和维生素E的协同抗氧化作用及可能的机制.结果 在三种化学发光体系中,CAPE和维生素E单独作用均可剂量依赖性的清除DPPH、超氧阴离子、羟自由基,联合作用后,CAPE100μmol·L-1+
目的 探讨转Bt基因水稻TT51对大鼠亲代生殖与子代发育的影响.方法 4周龄F0 Wistar大鼠给以基础饲料喂养适应1周后,按体重随机区组分为AIN93G对照组、MingHui63组和TT51组,每组30只雌鼠15只雄鼠.饲喂相应饲料70 d后,各组雌雄大鼠于每晚18：00按雌雄比2∶1合笼交配,次日晨7：00做阴道涂片或者观察阴栓,在光学显微镜下观察到精子或者发现阴栓当天记为孕0d,孕鼠单笼饲
目的 维康粉由L-精氨酸、维生素C、玉米低聚肽粉、L-瓜氨酸、还原型谷胱甘肽、叶酸、α-硫辛酸、乙基麦芽糖等为原料,经充填分装而成,成人推荐剂量为5g·d-1,即83.3 mg· kg-1.为保障消费者使用安全,对维康粉进行毒理学安全性评价.方法 按卫生部《食品安全性毒理学评价程序和方法》(2003)进行.结果 维康粉急性毒性试验最大耐受剂量(MTD)大于15000 mg·kg-1,根据急性毒性分
目的 建立了一种新型葡萄球菌肠毒素检测的二维(2 D)凝胶-溶胶分子印迹阵列式质量传感技术,为样品中多种葡萄球菌肠毒素的快速检测提供了新方法.方法 以葡萄球菌肠毒素A(SEA)和B(SEB)为靶标物,采用自组装溶胶凝胶法,将几种硅烷化试剂与水混合并超声制备合成初始胶；与SEA和SEB模板蛋白分子充分混合制备成印迹溶胶凝胶,采用旋涂法在压电石英晶体微天平(QCM)金电极表面原位合成可识别SEB和SE