[目的]探究鸭疫里默氏杆菌利福平耐药机制,寻找新的药物靶点,为鸭疫里默氏杆菌防治提供技术理论。[方法]从全国不同规模化养殖场中,分离鸭疫里默氏杆菌,利用K-B纸片法,测定不同临床分离株对利福平最小抑菌浓度;采用随机突变方法对筛选出的利福平耐药菌株进行随机突变;借助基因组高通量测序方法,明确耐药基因基因环境;利用大肠杆菌接合实验,检测利福平耐药性水平转移能力及其原件。[结果]分离出1株利福平高耐药菌株,其最小抑菌浓度达到1024ug/ml,基因组高通量测序结果表明,其含有的质粒是介导利福平耐药的关键因素。该质粒不仅可以介导鸭疫里里默氏杆菌不同血清型分离株对利福平产生耐药性,更可通过接合转导介导不同种属如大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等对利福平产生耐药性。[结论]与现有报道利福平耐药机制不同,本研究首次在质粒上发现介导利福平耐药元件,其可通过接合转导在同种属、甚至不同种属细菌中进行传播,介导宿主菌产生利福平耐药性,同时不改变宿主菌对其他药物敏感性,表明其具有一定特异性。