【摘 要】
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目的探讨MEK抑制剂AZD8330对多发性骨髓瘤细胞IM9及H929细胞增殖、凋亡的影响,并分析其可能的作用机制。方法不同浓度AZD8330处理H929及IM9细胞48h,用CCK-8检测细胞活力,并计
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目的探讨MEK抑制剂AZD8330对多发性骨髓瘤细胞IM9及H929细胞增殖、凋亡的影响,并分析其可能的作用机制。方法不同浓度AZD8330处理H929及IM9细胞48h,用CCK-8检测细胞活力,并计算出48h的IC50;Annexin V/7-AAD双标记法分析细胞凋亡情况;流式细胞术检测细胞周期的变化;westernblot方法检测细胞周期相关蛋白cyclin D、cyclin E及凋亡相关蛋白caspase3/9的水平。结果 AZD8330可显著抑制H929及IM9的细胞活力,且抑制效应呈一定的时间和剂量依赖性,IM9细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)为(19.88?2.7)n M,IM9细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)为(29.3?2.03)n M。分别用5、10及100 n M的AZD8330处理两种细胞,然后用PI标记流式细胞术分析细胞周期。细胞周期结果显示两种骨髓瘤细胞均发生G1期阻滞;并用westernblot方法检测细胞周期蛋白cyclin D和cyclin E,结果显示药物处理后cyclin D显著增高,但是cyclin E水平降低,促使细胞发生G1期阻滞。分别用10、100及500 n M的AZD8330处理两种细胞,Annexin V/7-AAD双标记法分析细胞凋亡,结果显示,随着药物浓度增加,两种细胞凋亡数量也相应增多。结论 MEK抑制剂AZD8330可有效抑制骨髓瘤细胞H929及IM9的增殖,使细胞周期阻滞于G1期,并促进细胞发生凋亡。
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