【摘 要】
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目的:本实验旨在研究lncRNA n332962对LPS调控牙髓干细胞(dental pulp stem cells) DPSCs分化为成牙本质系细胞样细胞(odontoblast-like cells,OBLCs)的影响。方法:构建lncRN
【机 构】
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军事口腔医学国家重点实验室口腔疾病国家临床医学研究中心陕西省口腔疾病重点实验室空军军医大学口腔医院牙体牙髓病科;
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目的:本实验旨在研究lncRNA n332962对LPS调控牙髓干细胞(dental pulp stem cells) DPSCs分化为成牙本质系细胞样细胞(odontoblast-like cells,OBLCs)的影响。方法:构建lncRNA n332962过表达慢病毒载体和基因沉默慢病毒表达载体,基因转染DPSCs获得相应的细胞系DPSC n332962 (+)、DPSC n332962(-)和DPSC ctrl。在6孔板培养DPSC n332962 (+)、DPSC n332962(-)和DPSC ctrl细胞24h,加入含0.1μg/ml LPS的矿化液(50mg/L维生素C、10nmol/Lβ-甘油磷酸钠、10mmol/L地塞米松)诱导,分别培养1周、2周、4周后终止。qRT-PCR、Western blot检测等方法观察牙本质涎磷蛋白(DSPP),碱性磷酸酶(ALP),骨钙素(OCN),牙本质基质蛋白1(DMP1)四种矿化相关基因和蛋白的表达;茜素红染色及定量分析矿化结节形成情况。结果:2周时DPSC n332962 (+)组四种相关基因和蛋白的表达均有显著抑制作用,矿化结节形成最少(P<0.05);DPSC n332962 (-)组四种相关基因和蛋白的表达均有显著增高,矿化结节形成最多(P<0.05)。结论:lncRNAn332962对LPS调控DPSC分化为OBLC有负向调控作用。
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