PCR-HRM结合测序在检测呼吸道细菌微生物群中应用

来源 :中华医学会急诊医学分会第十八次全国急诊医学学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wan801130
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目的 探讨PCR-HRM技术在检测呼吸道混合细菌菌群中的作用,为菌群失调和细菌多重感染诊断提供新思路.方法 以支气管镜从慢阻肺病人下呼吸道采集分泌液,提取细菌总DNA,并进行16S rDNA全长扩增,扩增产物纯化后连接pGEMT-esay载体,构建16S rDNA克隆文库.然后以细菌通用引物338F/518R扩增克隆文库V3区,并行HRM分析,根据不同HRM图型,挑选克隆株测序鉴定.结果 PCR-HRM可灵敏的区分不同细菌16S rDNA V3区,根据HRM图谱可减少克隆菌株测序样本.结论 PCR-HRM技术可作为快速、高通量、敏感、经济的菌群多样性检测方法,并为最终快速检测出病原菌提供分子依据.
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