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新孢子虫病(Neosporosis)是由犬新孢子虫(N.caninum)寄生在宿主体内引起的多种家畜共患的一种原虫病,此病对牛的危害尤为严重,主要造成母牛流产、产死胎以及新生儿的运动神经系统疾病。本研究利用地方虫株重组蛋白NcSR.S2t作为诊断抗原,建立了新孢子虫血清抗体的间接rELISA检测方法,初步组装成rELISA试剂盒,对新疆16个地区41个牛场1613份牛(包括牦牛)血清样品进行新孢子虫病流行病学调查。结果显示,该rELISA反应不与弓形虫、布氏杆菌阳性血清发生交叉反应;其批间和批内变异系数均小于10%;且应用美国IDEXX公司的商品化试剂盒进行了验证,其符合率达90%以上。被检的1613份血清中检出阳性血清212份,其不同地区的感染率为4~41.0%(平均为13.1%)。本次结果表明新孢子虫rELISA抗体检测方法具有较好的特异性和重复性,其检出率与商品化诊断试剂盒相近。本研究为新孢子虫病的快速诊断提供了一种新的有效途径,为试剂盒的进一步商品化奠定了基础。