【摘 要】
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猪圆环病毒2型(PCV2)是目前影响我国养猪业重要病原之一.本研究利用纯化的PCV2免疫Balb/c小鼠,筛选获得3株能稳定分泌抗PCV2-Cap蛋白抗体的杂交瘤细胞株(3E5、3E6和5A6),体外
【机 构】
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南京农业大学农业部动物细菌学重点开放实验室,江苏南京210095
【出 处】
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第五届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会2014年学术年会、中国畜牧兽医学会生物制药学分会暨中国微生物学会兽医
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猪圆环病毒2型(PCV2)是目前影响我国养猪业重要病原之一.本研究利用纯化的PCV2免疫Balb/c小鼠,筛选获得3株能稳定分泌抗PCV2-Cap蛋白抗体的杂交瘤细胞株(3E5、3E6和5A6),体外连续传代至第20代,抗体效价基本一致.其培养上清效价分别为1:12800、1:1600和1:6400,腹水效价为1:6400000、1:640000和1:800000;三株单抗重链均为IgG2a型,轻链为1c型;3株单抗间接免疫荧光试验检测PCV2,均产生特异性荧光反应;而且3E5和3E6都具有良好的中和PCV2活性.Westem blot结果为,3株单抗识别的Cap蛋白抗原表位需要Cap蛋白N端42-50aa区域的参与.应用3株单抗建立夹心ELISA检测PCV2抗原,结果3E5单抗反应特性最高,并具有较高特异性,可用于检测经β-丙内酯灭活的PCV2和真核表达的PCV2 Cap蛋白,从而为PCV2诊断和病毒蛋白功能研究提供了重要工具和手段.
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