【摘 要】
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目的：建立用巢式PCR联合焦磷酸测序技术检测乙型肝炎病毒的核苷类似物耐药基因的检测方法.方法：针对HBV P基因RT区的8个耐药位点,在其上下游分别设计两对特异性引物,构建巢式PCR扩增体系.并初步运用该方法结合焦磷酸测序对223例慢性乙肝患者进行8个耐药位点的检测和HBV病毒分型.结果：本研究所建立的巢式PCR联合焦磷酸测序检测技术的最低检测下限为2×103copies/ml.192例使用核苷类
【机 构】
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湖北省中医院检验科 湖北 430061
【出 处】
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第四届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛
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目的：建立用巢式PCR联合焦磷酸测序技术检测乙型肝炎病毒的核苷类似物耐药基因的检测方法.方法：针对HBV P基因RT区的8个耐药位点,在其上下游分别设计两对特异性引物,构建巢式PCR扩增体系.并初步运用该方法结合焦磷酸测序对223例慢性乙肝患者进行8个耐药位点的检测和HBV病毒分型.结果：本研究所建立的巢式PCR联合焦磷酸测序检测技术的最低检测下限为2×103copies/ml.192例使用核苷类似物(用药组)患者中,153例(79.7％)为B型HBV,39例(20.3％)为C型HBV.53例(27.6％)产生耐药突变,其中30.1％ (16例)发生204位点突变,发生180位点、181位点突变的均为5.6％(3/53),3.8％(2/53)发生236位点突变,1.9％(1/53)发生202位点突变；37.7 (20/53)同时发生180/204位点突变,同时发生181/236、204/250位点突变的均为3.8％(2/53)；同时发生3个位点突变的占7.5％ (173/180/240、180/181/204、180/184/204、180/202/204各1例).31例未用药组患者中25例(80.6％)为B型HBV,6例(19.4％)为C型HBV,未发现耐药突变的现象.结论：本检测方法能同时对HBV病毒进行基因分型和多个耐药突变位点进行检测,对药物的选用和疗效判断有重要的指导意义,适于临床推广使用.
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