【摘 要】
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目的:本研究通过RNA干扰技术,特异性沉默TGF-β1基因,验证复方麻杏石甘汤通过TGF-β/Smad信号通路调控,减轻放射性肺损伤的机制. 方法:1、清洁级SD大鼠分为中药组和正常对
【出 处】
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第五届国际中医、中西医结合肿瘤学术交流大会暨第十四届全国中西医结合肿瘤学术大会
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目的:本研究通过RNA干扰技术,特异性沉默TGF-β1基因,验证复方麻杏石甘汤通过TGF-β/Smad信号通路调控,减轻放射性肺损伤的机制.
方法:1、清洁级SD大鼠分为中药组和正常对照组,根据临床成人剂量的15倍灌胃3天后制备中药复方含药血清;2、细胞培养,射线照射,频率为3.64Gy/min,总剂量为8Gy;3、RNA干扰特异性沉默TGF-β1基因,PCR检测TGF-β1 mRNA;4、CCK-8法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡;5、(Western-blot)检测smad蛋白水平.
结果:1、与空白对照、阴性对照组比较,TGF-β1基因沉默组TGF-β1mRNA下降,差异有统计学意义(P＜0.05),针对TGF-β1基因特异性siRNA表达载体能够显著抑制靶基因的表达;2、与正常血清+siRNA组比较,含药血清+siRNA组的细胞活力下降,差异有统计学意义(P＜0.05),沉默TGF-β1基因可抑制放疗后肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖,加入含药血清仍能抑制细胞增殖;3、与正常血清+siRNA组比较,含药血清+siRNA组细胞凋亡率上升,差异有统计学意义(P＜0.05),沉默TGF-β1基因对放疗后肺泡Ⅱ型细胞凋亡无影响,加入含药血清能促进细胞凋亡;4、与大鼠血清+siRNA组比较,含药血清+siRNA 组P-Smad2、P-Smad3 下降,Smad6、Smad7上升,差异有统计学意义(P＜0.05),沉默TGF-β1基因可阻断放射性肺损伤TGF-β/smad信号通路,加入含药血清仍能传导该信号通路.
结论:复方麻杏石甘汤除了通过TGF-β/Smad信号通路,可能还通过调控其他信号传导通路干预放射性肺损伤.
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