【摘 要】
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目的:观察不同中医治法方药对大鼠肝癌ANXA2 表达的调控差异,以及ANXA2 在人肝癌细胞增殖中的作用。方法 1)采用DEN 诱发大鼠肝癌,分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗后,检测肝癌组织ANXA2 表达的差异;2)针对人ANXA2 基因mRNA 序列设计2个siRNA 靶点,分别经质粒重组后通过脂质体转染SMMC-7721 人肝癌细胞株,检测转染前后该基因的表达差异及细胞生长增殖情
【机 构】
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三峡大学医学院 443002 上海中医药大学基础医学院 201203 上海中医药大学基础医学院 2
【出 处】
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《中国中药杂志》第十届编委会暨中药新产品创制与产业化发展战略研讨高端论坛
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目的:观察不同中医治法方药对大鼠肝癌ANXA2 表达的调控差异,以及ANXA2 在人肝癌细胞增殖中的作用。方法 1)采用DEN 诱发大鼠肝癌,分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗后,检测肝癌组织ANXA2 表达的差异;2)针对人ANXA2 基因mRNA 序列设计2个siRNA 靶点,分别经质粒重组后通过脂质体转染SMMC-7721 人肝癌细胞株,检测转染前后该基因的表达差异及细胞生长增殖情况。结果:1)芯片结果显示,肝癌形成后, Anxa2 表达量达到造模前近10 倍。活血和健脾益气治法对其具有一定的下调作用;2)成功筛选到ANXA2 基因RNA 干扰的一个有效靶序列,经实时荧光定量PCR 检测到转染72h 后该基因的表达水平明显降低;3)MTT 的结果显示,有效干扰靶点转染144h 后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;4)FCM 结果显示,该基因RNA 干扰后引起细胞阻滞于G1 期。讨论:成功应用DEN 诱发大鼠肝癌形成,ANXA2 基因在肝癌形成的后期表达明显升高,经进一步生物学功能研究证实,该基因的高表达与肿瘤细胞的恶性增殖有关。
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