目的探讨miRNA对酒精代谢基因的调控作用,并揭示两者在酒精性肝损伤中的作用机制。方法首先通过NCTR数据筛选与酒精代谢相关的基因,然后通过miRBase、mirTar、TCGA、RNAhybrid等数据库预测可以调控这些酒精代谢基因3‘UTR区域的miRNA,进一步通过FREMSA、双荧光素酶报告基因实验双重验证miRNA与酒精代谢基因3’UTR区域的结合。进一步通过细胞转染miRNA mimics进行实时荧光定量PCR实验和Western blotting实验观察miRNA对靶基因的调控情况,并观察miRNA对酒精刺激后细胞的基因和蛋白水平上的影响。结果首先我们通过数据分析发现有21种酒精代谢基因在肝中发挥着重要的作用,然后通过多个数据库成功预测了可以与这21种酒精代谢基因3‘UTR相结合的多个miRNA。最终我们依据杂交自由能与miRNA和酒精代谢基因的关联强度为标准确定了一个hsa-miR-1301-3p和三个酒精代谢基因ADH6,ALDH5A1和ALDH8A1。通过FREMSA实验成功验证hsa-miR-1301-3p可以与ADH6,ALDH5A1,和ALDH8A1 mRNA3’UTR区域结合,双荧光素酶报告基因实验显示,转染miRNA mimics后荧光素酶的活性比转染miRNA-NC后的活性降低。细胞内hsa-miR-1301-3p可以抑制内源性ADH6,ALDH5A1和ALDH8A1基因的表达,用酒精刺激细胞并同时转染hsa-miR-1301-3p,可抑制由酒精引起的三个靶基因和靶蛋白表达水平的升高。结论 hsa-miR-1301-3p在肝脏中表达丰富,通过与ADH6,ALDH5A1和ALDH8A1 mRNA 3’UTR区域结合共同发挥着对肝损伤的调控作用,通过酒精诱导降低miRNA的表达可能是影响酒精代谢基因表达的重要因素。