再生障碍性贫血患者调节性T细胞体外扩增和功能鉴定

来源 :中华医学会第15次全国红细胞疾病(贫血)学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Konca
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  目的 评估再生障碍性贫血(SAA)患者Treg细胞的体外增殖能力和抑制功能.方法 取SAA患者和正常对照的外周血/骨髓单个核细胞,磁珠分选CD4+ CD25+ CD127dim调节性T细胞(Treg),采用"高浓度IL-2协同抗CD3/CD28单克隆抗体耦联的磁珠"方法对其进行体外培养、扩增,流式细胞术分析其细胞表型,与效应T细胞的混合培养实验分析其免疫抑制功能.结果 经过上述方法1-2周的体外培养,Treg细胞数量可扩增约10倍左右,并保留了Treg的表型特征;SAA患者的Treg细胞甚至有比正常对照更强大的增殖能力,且IL-10的分泌水平也不低于正常对照.此外,经培养之后的Treg细胞膜表面依然高表达CD25和CTLA-4分子.而在体外抑制试验中, (对照Teff∶对照Treg)(对照Teff∶SAA Treg)(SAA Teff∶对照Treg)(SAA Teff∶ SAA Treg)四组Teff细胞的增殖率分别为(1.89±0.49),(1.86±0.61), (1.94±0.64)和(1.90±0.64),并没有明显差异.Teff分泌的细胞因子IFN-γ也可以被SAA组中扩增后的Treg抑制.结论 采用"高浓度的IL-2协同抗CD3/CD28单克隆抗体耦联的磁珠"可以在体外成功扩增Treg细胞.SAA患者Treg细胞在体外有增殖能力,甚至超过正常对照水平.SAA患者Treg经培养扩增后对Teff细胞有抑制作用,且抑制效力不低于正常对照的Treg.本研究结果为后续Treg生物治疗提供了一定的基础.
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