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目的 研究小分子干扰RNA(small interference RNA,SiRNA)抑制高氧暴露下人肺腺癌A549细胞硫氧还蛋白-2(thioredoxin-2,Trx-2)表达及其与肺细胞代谢和凋亡的关系,探讨高氧肺损伤的发病机制和防治措施.方法 体外传代培养A549细胞系,待其在37℃5％ CO2培养箱中生长至接近亚汇合状态时,将体外化学合成Trx-2序列特异性的SiRNA通过Lipofectamine2000转染A549细胞.本研究随机分为Ⅰ无干扰空气组,Ⅱ无干扰高氧组,Ⅲ干扰后空气组,Ⅳ干扰后高氧组.高氧组持续暴露于常压高浓度氧中,氧浓度为92％,CO2浓度为5％；空气组仍置于含5％CO2培养箱中.四组分别于高氧或空气暴露12、24、48h提取A549细胞总RNA.采用半定量逆转录聚合酶链反应测定Trx-2、三磷酸腺苷合成酶6,8(ATPase6,8)及细胞色素c (cytochrome c,Cytc) mRNA的表达,Western blot检测Trx-2蛋白的表达,流式细胞术检测高氧和沉默Trx-2对A549细胞凋亡的影响.结果 (1)序列特异性SiRNA可显著抑制Trx-2表达,Western blot检测显示Trx-2蛋白表达明显下降,SiRNA-1、SiRNA-2、SiRNA-3三组中Trx-2蛋白表达均受到抑制,SiRNA-1组抑制效率最高(79.51％).(2)与无干扰空气组相比,无干扰高氧组24h Trx-2和Cytc mRNA的表达显著增高,但在48h Cytc mRNA的表达显著降低(P＜0.05).与干扰后空气组相比,干扰后高氧组24、48h Trx-2mRNA的表达显著减弱但在12、24h Cytc mRNA表达水平显著升高(P＜0.05). (3)与无干扰空气组相比,无干扰高氧组12、48h ATPase6 mRNA的表达显著增高但在24、48h ATPase8 mRNA的表达显著增高(P＜0.05).与干扰后空气组相比,干扰后高氧组24、48h ATPase6,8 mRNA的表达显著减弱(P＜0.05). (4)干扰后高氧组24、48h A549细胞凋亡百分数明显高于干扰后空气组(P＜0.05).结论 高氧暴露和沉默Trx-2导致A549细胞ATPase6,8表达下调和Cytc表达升高,表明能量代谢障碍和细胞凋亡参与高氧肺损伤发病过程,Trx-2对高氧肺损伤线粒体起重要的保护作用.