【摘 要】
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[目的]肺炎克雷伯菌是一种重要的条件致病菌和人兽共患病原菌,严重威胁人类和动物的健康。本研究旨在探究亚抑菌浓度丁香酚对猪源肺炎克雷伯菌AI-2型群体感应信号分子相关基
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[目的]肺炎克雷伯菌是一种重要的条件致病菌和人兽共患病原菌,严重威胁人类和动物的健康。本研究旨在探究亚抑菌浓度丁香酚对猪源肺炎克雷伯菌AI-2型群体感应信号分子相关基因的影响,以期为天然化合物作用机制研究提供有益参考。[方法]采用微量二倍稀释法测定丁香酚对猪源肺炎克雷伯菌KP2株的最小抑菌浓度,并进行药物敏感性试验;将1/4MIC丁香酚与受试菌株共培养后采用Illumina HiSeq 2500平台进行原核转录组测序分析;采用实时荧光PCR检测LuxS/AI-2合成主要条件基因luxS、pfs、lsrR、lsrK表达量。[结果]丁香酚对KP2株的最小抑菌浓度为2μg/mL,KP2株为多重耐药肺炎克雷伯菌。丁香酚处理组luxS和lsrR基因FPKM值低于对照组,pfs和lsrK基因FPKM值高于对照组。qPCR结果显示,亚抑菌浓度丁香酚可使luxS基因表达下调,使pfs、lsrR、lsrK基因表达上调,lsrR、lsrK基因表达量均显著高于对照组。lsrR基因检测结果与测序结果存在差异,结合其FPKM值高于lsrK基因且log2(FC)值较高,推测丁香酚上调lsrR和lsrK基因表达,但lsrR基因表达量更高,总体表现为转录抑制。[结论]丁香酚对猪源肺炎克雷菌抑菌活性较好;亚抑菌浓度丁香酚通过下调luxS基因表达,上调pfs、lsrR、lsrK基因表达从而抑制lsrABCD操纵子的转录,进而抑制AI-2分子的合成。
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