海州香薷铜胁迫全长cDNA文库的构建与分析

来源 :中国博士后生命科学学术论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:JINZI1975
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海州香薷是我国重要的铜耐性植物,为了揭示其耐铜分子机理,本研究以缺铜(0 μmol/LCuSO4)和高铜(100 μmol/L CuSO4)处理3 h、6 h和24 h的根尖为建库材料,提取总RNA,以等量混合后纯化的mRNA作为反转录模板,采用SMART和LD-PCR技术合成双链cDNA,构建海州香薷缺铜和高铜胁迫cDNA文库。构建的缺铜胁迫cDNA原始文库滴度为1.22E+08 pfu/mL,文库所含独立克隆数为6.41E+07个,扩增文库滴度为3.96E+12 pfu/mL,重组率为98%,插入片段82%大于500 bp。高铜胁迫cDNA原始文库滴度为3.44E+07pfu/mL,文库所含独立克隆数为1.81E+07个,扩增文库滴度为4.86E+12pfu/mL,重组率为99%,插入片段79%大于500 bp。两个文库质量符合标准要求。
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