耐高温α-淀粉酶高产菌的发酵工艺研究

来源 :华东六省一市生物化学与分子生物学会2015年学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yty3224
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α-淀粉酶可从淀粉分子内部切开α-1,4糖苷键,生成糊精和还原糖,耐高温α-淀粉酶具有较好的耐热性,在酿造、食品、纺织等工业中应用广泛.本文以由麦丹生物有限公司福州研究院筛选、保藏的耐高温α-淀粉酶高产菌BL-H19为研究材料,探索产酶的主要影响因素,确定最佳培养条件,并对补料分批发酵工艺进行研究. 为了提高该菌株的产酶量,本文采用单因素法确定最佳碳源、氮源以及各培养基组成对产酶的影响。结果表明糊精对该菌株产酶有诱导作用,采用高温淀粉酶水解玉米淀粉制备糊精,并确定最适宜的水解条件,以DE值为20-26的糊精为碳源时菌株有较高产酶。利用响应面法对多种影响产酶量的因素进行统计分析,并最终得出摇瓶最佳产酶的培养条件,最佳培养基组成为:豆饼粉2.6%,棉籽粉2.1%,硫酸铵0.5%,氯化钙0.045%,玉米浆3%,磷酸氢二钾1.4%,磷酸二氢钾0.6%,柠檬酸钠0.2%,糊精(DE值为20-26 )12%,起始pH为6.5左右,温度37℃,转速260rpm条件下发酵7天,耐高温α-淀粉酶产量由1970U/mL提升至4630U/mL,约是培养基优化前酶活的2.35倍。 在10L全自动发酵罐小试验证并对补料分批发酵工艺进行了研究,菌体生长阶段控制pH稳定在6.5,产酶阶段pH上升,控制pH在7.0,并补加糊精维持还原糖浓度为20-30g/L,此条件下该菌株有较高产酶,酶活可达10300U/mL,可进行进一步放大生产研究。
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