【摘 要】
：
[目的]研究转录因子NRF2 (Nuclear factor E2-related factor 2)在人肝细胞癌组织和细胞中的表达、转录活性及在化疗敏感性中的作用；系统评价一组新型NRF2-ARE (Antioxidant Response Element)抑制剂对肝癌细胞中NRF2-ARE活性的影响以及对化疗敏感性的促进效果.[材料和方法]收集临床新鲜肝细胞癌组织及相应癌旁组织标本,进行NRF
【机 构】
：
中国医科大学附属第一医院介入放射科 中国医科大学公共卫生学院环境毒理学研究室
【出 处】
：
中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
论文部分内容阅读
[目的]研究转录因子NRF2 (Nuclear factor E2-related factor 2)在人肝细胞癌组织和细胞中的表达、转录活性及在化疗敏感性中的作用；系统评价一组新型NRF2-ARE (Antioxidant Response Element)抑制剂对肝癌细胞中NRF2-ARE活性的影响以及对化疗敏感性的促进效果.[材料和方法]收集临床新鲜肝细胞癌组织及相应癌旁组织标本,进行NRF2-ARE信号通路相关蛋白和mRNA检测；应用基因稳转沉默技术研究NRF2沉默和系统活化对肝癌细胞株化疗敏感性的影响；观察以乙硫异烟胺(Ethionamide,ETH)为代表的新型NRF2-ARE抑制剂对肝癌细胞化疗敏感性的改进效果.[结果]Western blot和免疫组化检测结果显示,NRF2蛋白在肝细胞癌组织中的表达水平显著高于相应的癌旁组织,且癌组织中增加的NRF2以高活性的低磷酸化型为主；受NRF2调控的抗氧化酶(NQO1,HO-1和GCS)的蛋白表达水平在癌组织中也明显高于癌旁组织.RT-qPCR结果发现,肝癌组织中NRF2的mRNA水平显著高于癌旁组织,同时其下游ARE依赖基因NQO1,AKRlC2,AKRlC3,AKRlC4在癌组织中的转录水平高于癌旁组织(p＜0.05),而KEAP1的mRNA和蛋白水平均无显著差异.在人肝癌细胞株HepG2中的体外研究发现,NRF2稳转沉默显著增加细胞对As2O3等化疗药物的敏感性,表明NRF2-ARE是决定肝癌细胞对化疗敏感性的关键因素之一.无毒性剂量的ETH以及异烟肼在HepG2细胞内显著抑制NRF2-ARE活性,降低ARE依赖基因的mRNA水平,并呈明显的剂量-效应关系.更为重要的是,ETH可以显著降低化疗药物对NRF2-ARE的活化作用,降低ARE基因的诱导性表达,并增加细胞对包括As2O3在内的化疗药物的细胞毒性.[结论]NRF2在肝细胞癌组织中的表达和活性高于癌旁组织；高表达的NRF2是决定肝细胞癌化疗敏感性的主要因素之一；以ETH为代表的新型NRF2-ARE抑制剂可有效降低基础和化疗过程中NRF2的活化,从而提高癌细胞对化疗药物的敏感性.
其他文献
目的:探讨L5/S1椎间盘突出症的椎间盘镜下髓核摘除术(Microendoscopic Discectomy,MED)的特点.方法:2009年01月至2014年2月,对47例无明显腰椎不稳的L5/S1椎间盘突出病人行椎间盘镜下髓核摘除术,其中男性25例,女性22例;年龄23-72岁,平均41.5岁.按Yeung分型,椎间孔型18例,中央型7例,旁中央型12例.记录术前、术后3个月及末次随访时的JO
目的:探讨以内踝前动脉穿支为蒂的隐神经营养血管逆行岛状皮瓣修复足踝部组织缺损的方法.方法:2007年3月至2009年8月,对17例踝、足部软组织缺损的创面,以内踝前动脉穿支为蒂的隐神经营养血管逆行岛状皮瓣进行修复.以隐神经相伴行的大隐静脉体表投影为轴线,根据受区大小、部位及旋转点的位置设计逆行岛状皮瓣.皮瓣切取面积为5.0 cm×3.0 cm ～ 10.0 cm×8.0 cm,术中大隐静脉与小隐静
目的:探讨老年髋部骨折术后发生对侧髋部再骨折的原因.方法:自2006年1月-2014年01月,共手术治疗老年髋部骨折306例,术后发生对侧髋部再骨折病例共16例,分析再发对侧骨折病例的发生率、骨折类型、再骨折时间间隔和危险因素.结果:老年髋部骨折术后患者中,对侧髋部再骨折发生率为5.2％.初次粗隆间骨折术后再发对侧髋部骨折占6.8％,初次股骨颈骨折术后再发对侧髋部骨折占2.6％.对侧髋部骨折的发病
[目的]研究雄黄染毒及甘草次酸干预对小鼠海马突触间隙中半胱氨酸(cysteine,Cys)和同型半胱氨酸(homocystcinc,Hcy)水平的影响,探讨雄黄可能的毒性作用及为慢性砷中毒防治提供理论依据和研究思路.[方法]将70只健康ICR小鼠随机分成对照组、雄黄低、中、高剂量组(0.15 g/kg、 0.45 g/kg、 1.35 g/kg雄黄)、甘草次酸对照组(48 mg/kg甘草次酸)、甘
[目的]通过观察雄黄对海马组织XAG-系统、Xc-系统、γ-GCS、MRP-1及Nrf2的影响,探讨雄黄干扰GSH合成的可能分子机制,为防治雄黄引起的药源性慢性砷中毒提供理论依据.[方法]ICR小鼠暴露不同剂量雄黄(0,0.15g/kg,0.45g/kg,1.35g/kg)8周后,测定血和海马组织中砷含量；采用Real-time PCR和Western blot方法测定海马组织中EAAT1、EAA
[目的]探讨砷对星形胶质细胞(Astrocyte,AC)内谷胱甘肽(Glutathione,GSH)合成的影响及可能机制.[方法]从新生的Wistar胎大鼠的大脑皮质上提取AC,传代培养3代,以GFAP免疫荧光法鉴定,随机分组,培养液中砷(NaAsO2)含量分别为0 μ mol/L、100 μ mol/L、200 μ mol/L、400 μ mol/L和600 μ mol/L对AC染毒4h,观察细
[目的]研究噻唑烷二酮类药物罗格列酮导致HepaRG细胞氧化损伤的作用特点,探讨其发生的可能机制.[方法]选用HepaRG细胞为体外模型,以12.5、25、50 μ M罗格列酮处理48小时,采用DCFH-DA荧光探针装载,流式细胞仪测定细胞内ROS含量,采用ABTS法检测药物对细胞总抗氧化能力的影响,采用WST法检测超氧物歧化酶活性变化,以及检测过氧化氢酶以及谷胱甘肽过氧化物酶活性的变化.用wes
[目的]研究噻唑烷二酮类药物曲格列酮对HepaRG细胞氧化损伤的作用特点,探讨其发生的可能机制.[方法]选用HepaRG细胞为体外模型,以12.5、25、50μM曲格列酮处理48小时,采用DCFH-DA荧光探针装载,流式细胞仪测定细胞内ROS含量,采用ABTS法检测药物对细胞总抗氧化能力的影响,采用WST法检测超氧物歧化酶活性变化,以及检测过氧化氢酶以及谷胱甘肽过氧化物酶活性的变化.用wester
佐太是珍宝类藏成药中最为核心的成分,是历代藏族名医对剧毒水银,硫磺,能持八金,能持八矿及其他原辅料经特殊工艺炼制而成的一种具有独特疗效的兰黑色粉末制剂.佐太含beta-硫化汞,而常用中药矿物药朱砂则含alpha-硫化汞.汞是已知的环境毒物,而肝脏是其靶器官.佐太和朱砂与氯化汞和甲基汞的肝毒性能相提并论吗？[目的]对佐太,朱砂和汞化合物的肝毒性进行比较,研究佐太朱砂的肝毒性毒性作用,回答含汞传统药物
[目的]通过恒河猴静脉注射重复给予柔红霉素,观察其产生的毒性反应及严重程度、主要毒性靶器官及损害的可逆程度并检测毒代动力学参数,为后续其它试验研究提供依据并为临床合理用药提供一定的参考.[材料和方法]普通级恒河猴28只,3-4岁,雌雄各半,购自中国科学院昆明动物研究所实验动物中心.动物经检疫适应21天后选择24只动物按体重随机分成溶媒对照组,柔红霉素低、中和高剂量组(1.0,2.0,和6.0mg·