【摘 要】
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目的:采用1个载体编码2个shRNA技术，构建Livin和Survivin联合靶向的SiRNA重组表达载体，观察其协同诱导结直肠癌细胞的凋亡效应。方法:构建Livin和Survivin联合靶向的SiRNA重组表达载体并转染结肠癌细胞，通过RT-PCR和Western blot方法分别检测Livin和Survivin的表达，通过MTT法检测SiRNA对细胞增殖的抑制作用，利用流式细胞仪检测处理后细胞
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院腹腔镜外科 华中科技大学同济医学院微生物寄生虫系
【出 处】
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第四届中国武汉国际微创外科学术研讨会
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目的:采用1个载体编码2个shRNA技术，构建Livin和Survivin联合靶向的SiRNA重组表达载体，观察其协同诱导结直肠癌细胞的凋亡效应。方法:构建Livin和Survivin联合靶向的SiRNA重组表达载体并转染结肠癌细胞，通过RT-PCR和Western blot方法分别检测Livin和Survivin的表达，通过MTT法检测SiRNA对细胞增殖的抑制作用，利用流式细胞仪检测处理后细胞的凋亡效应。结果:经酶切鉴定和测序分析证实Livin和Survivin联合靶向的SiRNA重组表达载体构建成功，可以抑制结直肠癌细胞Livin和Survivin的mRNA及蛋白的表达，使肿瘤细胞存活数量下降，凋亡细胞比率增加，但协同抑制作用比单独干扰Livin或Survivin基因弱。结论:Livin和Survivin联合靶向的SiRNA重组表达载体构建成功，它能抑制Livin和Survivin基因表达并能诱导肿瘤细胞凋亡，但协同抑制作用比单独干扰Livin或Survivin基因弱。
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