生长因子Progranulin在慢性牙周炎中的表达及作用研究

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目的:TNF-α在牙周炎的发病过程中具有重要意义,可以通过激活相关炎性通路如NF-κB信号通路从而促进下游因子表达,继而导致炎症发生。颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)是一种多功能生长因子,可以通过与TNF-α的细胞表面受体竞争性结合,抑制TNF-α诱导的炎症反应。并有研究报道重组PGRN有效抑制了类风湿性关节炎动物模型的炎症反应,具有保护性作用。PGRN的这种抗炎作用可以为牙周炎的防治提供新的思路。目前PGRN在慢性牙周炎中的作用尚无报道,PGRN是否在牙周炎中起抗炎作用尚不清楚。本研究拟探讨PGRN在牙周局部组织中的表达及其与牙周组织局部炎症状态之间的关系,并通过动物实验,研究PGRN对大鼠实验性牙周炎炎症反应的影响。方法:1、采用实时定量RT-PCR法和免疫组化法检测PGRN在慢性牙周炎患者牙龈组织和正常对照者牙龈组织中m RNA水平及蛋白水平的表达情况。实时定量RT-PCR法检测牙龈组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达。统计学分析各组间牙周组织PGRN的表达水平,及其与炎症因子的相关性。2、建立大鼠实验性牙周炎模型,牙周局部注射r PGRN,无菌PBS注射作为对照,采用实时定量RT-PCR法和酶联免疫吸附试验检测r PGRN治疗后牙周组织中炎症因子TNF-α、IL-1β的表达水平,并采用H&E染色的方法观察注射局部牙龈组织炎症细胞的浸润程度。结果 1、牙龈组织切片免疫组化染色结果显示,慢性牙周炎患者牙龈组织中PGRN的表达明显高于正常牙龈组织。实时定量RT-PCR检测结果表明,慢性牙周炎患者组PGRN在m RNA水平表达较正常对照组明显增高,并且PGRN与炎症因子TNF-α、IL-6 m RNA表达呈正相关性。2、动物实验的结果表明,大鼠牙周局部注射r PGRN 4周后,r PGRN注射组牙周组织中炎症因子TNF-α、IL-1β在m RNA和蛋白水平均明显低于PBS注射对照组,H&E染色结果示r PGRN注射组牙龈组织炎症细胞浸润数量较对照组减少。结论:我们研究发现,PGRN在慢性牙周炎牙龈组织中表达水平明显增高,外源性r PGRN局部注射可有效抑制大鼠实验性牙周炎的炎症反应,说明PGRN在牙周炎中具有抗炎保护作用。
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