【摘 要】
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目的:下调冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)的表达,观察HK-2细胞对缺血缺氧耐受能力的变化..方法:构建人pGFU6-hCIRP干扰质粒.取处于对数生长期的HK-2细胞接种于6孔板,待细胞汇合度达到80％左右时用Lipofectamin 2000行化学转染,同时设立阴性对照组(pGFU6组).转染后24h用Western blot检测各组CIRP蛋白的表达情况.取处于对数生长期的HK-2细胞接种于
【机 构】
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武汉大学中南医院,武汉大学肝胆疾病研究院,武汉大学移植医学中心,移植医学技术湖北省重点实验室,湖北武汉;中南大学湘雅三医院,卫生部移植医学工程技术研究中心,湖南长沙
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目的:下调冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)的表达,观察HK-2细胞对缺血缺氧耐受能力的变化..方法:构建人pGFU6-hCIRP干扰质粒.取处于对数生长期的HK-2细胞接种于6孔板,待细胞汇合度达到80％左右时用Lipofectamin 2000行化学转染,同时设立阴性对照组(pGFU6组).转染后24h用Western blot检测各组CIRP蛋白的表达情况.取处于对数生长期的HK-2细胞接种于96孔板,同样的方法将pGFU6-hCIRP质粒和空载质粒转染入细胞,24h后用不含血清的培养基后置于缺氧培养箱(5％ CO2,95％ N2)中培养.培养12h后用MTT法测定各组细胞的存活率.
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目的:探讨他克莫司(Tac)诱导移植术后糖尿病(PTDM)过程中对外周组织脂肪因子表达谱的影响,并探究其机制.方法:健康SD大鼠18只,随机分为三组:对照组(生理盐水,1mL· kg-1.d-1)、模型组(给予Tac,1mg.kg-1.d-1)、治疗组(Tac,1 mg.kg-1.d-1+罗格列酮,4 mg.kg-1.d-1).每天监测体重,每两天测空腹血糖,并于第14天检测OGTT及空腹胰岛素.
目的:对中国南方ESRD患者中HLA的表达进行分析,探讨HLA与ESRD的易感风险.方法:收集2000年1月～2013年12月在南方医科大学南方医院、中国人民解放军第458医院等16家移植中心登记等候肾脏移植的ESRD患者,年龄、性别不限.通过病历复习选择HLA基因分型资料完整的ESRD患者4904例.健康对照组为2686例南方汉族健康献血者.采用PCR-SSP分型方法进行HLA-A、B、DR基因
目的:探索地塞米松(DX)诱导骨髓来源抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSC)在同种异系小鼠皮肤移植模型中的表达及免疫负调节作用及其机制方法:以雌性BALB/c小鼠皮肤为供体,雄性C57BL/6小鼠为受体,建立同种异系小鼠尾-背皮肤移植模型(n=40),将受者随机分为实验组和对照组,各20只,实验组每日地塞米松磷酸盐溶液(Dex)5 mg/kg腹腔注射
目的:研究亚低温预处理对小鼠肝脏缺血再灌注损伤后Bax蛋白表达水平的影响.方法:雄性BALB/C小鼠15只,随机分为假手术对照组(Sham组)、正常体温组(NIR组)和亚低温预处理组(MPC组),每组5例.Sham组仅分离肝门区NIR组在正常体温下用无损伤血管夹夹闭门静脉和肝动脉的分支,阻断肝左、中叶血流,造成肝脏70％的缺血,缺血35min,再灌注24h;MPC组先使小鼠降温至32℃2h预处理,
目的:构建人源pEGFP-C1-CIRP (pEGFP-C 1-hCIRP)质粒,瞬时转染HK-2细胞.方法:在PubMed中Nucleotide条目下查找hClRP mR人源NA的序列,用高保真RT-PCR法扩增该mRNA的CDS序列(上游引物为CGGAATTCATGGCATCAGATGAAGGCA,下游引物为CGGGA TCCAGCCA TTGGAAGGACGAT),限制性内切酶BamH I和
目的:建立小鼠肾脏亚低温模型,并检测不同时间内冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)的表达,为阐明CIRP在DCD供肾中的作用打下基础.方法 取15只雄性BALB/c小鼠随机分成5组,每组3只.1％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后置于25℃的环境中(环境低温法),并用电子温度计监测小鼠肛温.当小鼠肛温降至32±1℃时开始计时,适时追加麻药,分别于0h、2h、4h、6h、8h后迅速取出小鼠肾脏标本.小鼠肾脏标本一
目的:探讨肾脏亚低温预处理对缺血再灌注后肾功能损伤的保护作用.方法:取30只雄性BALB/c小鼠随机分成3组,每组10只.亚低温预处理组:利用环境低温法(如前述)将小鼠体温降至32±1℃并维持2小时.常规消毒铺巾后取下腹正中切口进入腹腔,用棉签推开肠道,打开后腹膜,用小动脉夹夹闭左侧肾动脉、肾静脉35min后复通,同时切除右侧肾脏.单纯缺血再灌注组:正常体温小鼠腹腔注射麻醉,取下腹正中切口,用小动
目的:探讨亚低温预处理对肾脏缺血再灌注后氧化应激损伤的保护作用.方法:取30只雄性BALB/c小鼠随机分成3组,每组10只.亚低温预处理组:利用环境低温法将小鼠体温降至32±1℃并维持2小时.取下腹正中切口进入腹腔,打开后腹膜,用小动脉夹夹闭左侧肾动脉、肾静脉35min后复通,同时切除右侧肾脏.单纯缺血再灌注组;正常体温小鼠腹腔注射麻醉,取下腹正中切口,用小动脉夹夹闭左侧肾动脉、肾静脉35min后