乳铁蛋白主要存在于哺乳动物的乳汁中,是由708个氨基酸组成的铁结合性糖蛋白,具有广谱抗菌、抗病毒、抗癌、免疫调节、抗氧化等生物活性.乳铁蛋白作为一种新兴功能性食品配料,已被广泛应用于乳制品中,尤其婴儿配方奶粉中.本文旨在利用UPLC-MS/MS,采取蛋白组学中自下而上的鸟枪法—特征肽段定量靶蛋白,通过多反应检测(MRM)模式,建立一种简单、快速、准确测定乳制品中乳铁蛋白的方法.筛选出3个新特征肽段(即,标签肽),选择其中响应最好的肽段作为定量肽段,其同位素标记肽段作为内标肽段,优化了前处理条件、色谱条件和质谱参数,并进行了方法学考察.结果 表明,乳铁蛋白浓度在10-1000nmol/L范围内具有良好线性关系(r=0.991),检出限为0.3mg/100g,日内日间精密度分别为2.5％和4.1％,回收率为87％～105％,并将建立方法应用于液体牛奶、酸奶、全脂奶粉、脱脂奶粉、乳清蛋白粉、婴幼儿配方奶粉等多种乳制品中乳铁蛋白的检测.本法具有灵敏度、准确度高,重现性好,前处理简单的优点,可用于多种乳制品中乳铁蛋白的定量测定.