慢病毒介导siRNA下调大鼠软骨细胞Ob-Rb表达抑制骨关节炎关节软骨破坏

来源 :2015成都国际骨科论坛暨四川省医学会第19次骨科学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuantao22222
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  目的:通过慢病毒介导的小干扰RNA,阻断关节软骨细胞瘦素功能型受体亚型B的表达,从而阻断瘦素(Leptin)介导的骨关节炎关节软骨的前炎性反应,抑制OA关节软骨的破坏,为临床OA的基因治疗提供新思路和奠定实验基础.方法:使用SD大鼠原代培养第三代关节软骨细胞,经Leptin诱导后,用慢病毒介导的Ob-Rb_SiRNA或阴性对照慢病毒(对照组)进行转染,筛选出沉默效率最高的SiRNA(Lv_ Ob-Rb_SiRNA1),并测定MMP-9、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5等下游前炎性因子的表达.切断雄性SD大鼠前交叉韧带并切除内侧半月板,建立动物骨关节炎模型,然后将大鼠随机分为四组,实验组术后一周膝关节腔注射Lv Ob-Rb_SiRNA1,阴性对照组注射等剂量阴性对照慢病毒,空白对照组注射等体积PBS.
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