气相色谱-质谱联用测定血液中15N标记氨基酸同位素丰度

来源 :第十届全国试剂与应用技术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Hotcoolman
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  在生物医学领域,稳定同位素标记氨基酸常作为示踪剂对生物体的新陈代谢进行表达或用于蛋白质合成率的测定,同时也被用于蛋白质定量组学研究[1]。《Cell》近期报道以同位素标记的谷氨酰胺和葡萄糖作为示踪剂,得到了在MYC癌基因表达及缺氧的条件下细胞中谷氨酰胺的代谢情况,从而指导癌症疾病的靶向治疗[2]。血液或组织液中标记氨基酸同位素丰度的准确测定直接影响了代谢过程的精准表达。而实际血液或组织液样品中基质较为复杂,氨基酸含量较低,其同位素丰度的检测是难点所在。本文以硅烷化试剂N-甲基-N-(三甲基硅烷)三氟乙酰胺(MSTFA)对氨基酸加以衍生,建立了衍生化15N标记丙氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酸和尿素同位素丰度的气质联用检测方法。
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