目的：研究表明,ZIC1是胃癌和肠癌潜在的肿瘤抑制因子,通过检测乳腺癌组织标本及人乳腺癌细胞中ZIC1 mRNA的差异表达,检测ZIC1启动子甲基化情况,以期探讨ZIC1在乳腺癌中表达调控的可能机制及基因启动子甲基化检测对乳腺癌临床诊断的潜在价值：同时通过外源性过表达ZIC1联合抗肿瘤药苦参碱对人乳腺癌细胞是否有协同抗增殖作用,并探讨其作用机制.
　　方法：(1)临床研究：使用实时定量RT-PCR检测24例乳腺癌及癌旁组织中ZIC1基因mRNA表达水平：用甲基化特异性PCR(MSP)检测28例乳腺癌及癌旁组织的ZIC1基因启动子区DNA甲基化情况。(2)细胞实验：PCR检测人乳腺癌细胞株和正常组织中ZIC1基因mRNA表达水平：Western Blot法观察人乳腺癌细胞系与乳腺正常组织中ZIC1蛋白表达水平。细胞转染ZIC1和筛选后,采用克隆形成实验和MTS实验观察转染ZIC1对乳腺癌细胞MCF.7和Bcap37增殖的影响,采用MTS实验及流式细胞术检测转染ZIC1及联合苦参碱对细胞抗增殖及细胞凋亡和细胞周期的影响。采用甲基化特异性PCRfMSP)、亚硫酸氢-钠测序法(BGS)及亚硫酸氢钠-限制性酶切法(COBRA)检测人乳腺癌细胞株经甲基化抑制剂Aza处理前后ZIC1基因启动子甲基化情况。
　　结果：RT-PCR结果显示乳腺癌组织中ZIC1 mRNA表达水平较癌旁组织明显下调(P=0.0017,n=24).MSP检测发现乳腺癌组织发生ZIC1启动子高频率甲基化(83%,23/28),而癌旁组织发生低甲基化或者没有发生甲基化.PCR结果显示人乳腺癌细胞株ZIC1mRNA表达水平较乳腺正常组织明显下调.Western Blot法发现ZIC1在人乳腺癌细胞系较乳腺正常组织蛋白水平低表达.转染Z1C1基因后乳腺癌细胞株(MCF-7和Bcap37)克隆形成数较转染空载体对照组明显减少(P<0.05).MTS实验亦发现转染ZIC1后乳腺癌细胞株(MCF-7和Bcap37)的存活细胞数较空载体对照组明显减少(P<0.05).流式细胞术检测发现转染ZIC1后MCF-7和Bcap37细胞的凋亡水平较空载体组显著增加(P<0.051.MTS实验及流式细胞术检测转染ZIC1及联合苦参碱对细胞有提高抑制肿瘤细胞生长及增加细胞凋亡的作用。甲基化特异性PCR(MSP)、亚硫酸氢钠测序法(BGS)及亚硫酸氢钠-限制性酶切法(COBRA)检测发现人乳腺癌细胞株经甲基化抑制剂Aza处理后ZIC1基因启动子高频率甲基化.
　　结论：ZIC1在乳腺癌组织中表达下调,并与启动子DNA高甲基化密切相关.体外细胞试验证明ZIC1可抑制乳腺癌细胞增殖,过表达ZIC1促进乳腺癌细胞凋亡.苦参碱、转染ZIC1对人乳腺癌MCF-7和Bcap37细胞增殖具有抑制作用。苦参碱能增强转染ZIC1对乳腺癌细胞的抑制作用。